可替(tì)寧-牛血清蛋(dàn)白共(gòng)軛物的製備(bèi)方法有哪(nǎ)些
2025-05-21
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可替寧(níng)-牛(niú)血清蛋(dàn)白(bái)共軛(è)物的(dí)製備方法主要有(yǒu)以(yǐ)下(xià)幾(jī)種:
碳二(èr)亞(yà)胺(àn)法
原(yuán)理:碳二亞(yà)胺類(lèi)化合物(wù)作為脫水(shuǐ)劑,促(cù)進羧(suō)基和(hé)氨基(jī)之間(jiān)形成(chéng)酰(xiān)胺鍵。可替寧(níng)分子中存在(zài)羧基等活(huó)性(xìng)基團,牛(niú)血清(qīng)蛋白(bái)上(shàng)有(yǒu)豐富(fù)的(dí)氨基,利用碳二(èr)亞胺(àn)使(shǐ)兩者(zhě)發生縮(suō)合(hé)反應,從(cóng)而實現偶(ǒu)聯(lián)。
步驟:首先將可(kě)替(tì)寧(níng)和牛(niú)血清蛋白分別溶(róng)解(jiě)在(zài)合(hé)適的緩衝液中(zhōng),然後(hòu)將(jiāng)碳(tàn)二亞(yà)胺(àn)試劑(如(rú)EDC,即(jí)1-乙基-(3-二(èr)甲基氨(ān)基(jī)丙基(jī))碳(tàn)二亞(yà)胺鹽酸鹽)加(jiā)入到可(kě)替(tì)寧(níng)溶(róng)液中,活(huó)化(huà)一段時間後,將活(huó)化後的(dí)可替(tì)寧溶液緩(huǎn)慢滴加到(dào)牛(niú)血清(qīng)蛋白溶(róng)液(yè)中,在(zài)一定(dìng)的(dí)溫度和(hé)pH條件下攪(jiǎo)拌反(fǎn)應數(shù)小時。反應(yīng)結束(shù)後,通(tōng)過透(tòu)析或凝(níng)膠(jiāo)過濾(lǜ)等方法去除(chú)未反(fǎn)應的(dí)物(wù)質(zhì)和雜(zá)質,得到(dào)可(kě)替(tì)寧-牛血清蛋(dàn)白共軛(è)物(wù)。
戊(wù)二醛法
原理:戊(wù)二(èr)醛是一(yī)種(zhǒng)雙功(gōng)能(néng)交聯劑(jì),能夠(gòu)與(yǔ)蛋白(bái)質分(fēn)子中(zhōng)的(dí)氨(ān)基(jī)發(fā)生(shēng)反應,形成席夫(fū)鹼(jiǎn)結構,從而(ér)將兩(liǎng)個(gè)蛋白質分(fēn)子連接(jiē)起(qǐ)來(lái)。
步驟:把牛血(xiě)清蛋白溶(róng)解(jiě)在(zài)緩衝(chōng)液中,加(jiā)入(rù)適(shì)量(liáng)的戊二(èr)醛(quán)溶(róng)液,在一(yī)定(dìng)溫(wēn)度下(xià)攪(jiǎo)拌(bàn)反應一段時(shí)間(jiān),使牛血(xiě)清蛋(dàn)白分(fēn)子之(zhī)間發(fā)生輕(qīng)度交聯,這樣可(kě)以增加蛋(dàn)白的反應(yīng)活(huó)性(xìng)位點。然後將可替寧加入(rù)到上述反(fǎn)應體(tǐ)係中,繼續(xù)在(zài)適宜的條件下反應(yīng)數小時(shí)。反(fǎn)應(yīng)完成後,同樣(yàng)需要進行純(chún)化(huà)處理,以(yǐ)獲得(dé)純淨的(dí)共軛(è)物。
活性酯(zhǐ)法(fǎ)
原理:先將(jiāng)可(kě)替寧轉化(huà)為活(huó)性酯形(xíng)式,活性酯能夠與(yǔ)牛血清蛋(dàn)白(bái)上(shàng)的氨(ān)基快(kuài)速反(fǎn)應(yīng),形成穩定(dìng)的酰(xiān)胺(àn)鍵,完(wán)成(chéng)偶(ǒu)聯。
步驟(zhòu):使用如N-羥基琥珀(pò)酰亞(yà)胺(àn)(NHS)等試(shì)劑與(yǔ)可替(tì)寧(níng)反應(yīng),生(shēng)成可替寧的活(huó)性酯衍生物。將(jiāng)牛(niú)血(xiě)清(qīng)蛋白溶(róng)解(jiě)在合(hé)適的(dí)緩衝(chōng)液中,再將(jiāng)製備好(hǎo)的可(kě)替(tì)寧活性酯(zhǐ)衍生物緩慢(màn)加(jiā)入到牛(niú)血清(qīng)蛋白溶(róng)液(yè)中(zhōng),在(zài)一定的(dí)溫度(dù)和pH條件下(xià)反應數(shù)小時,使兩(liǎng)者發(fā)生(shēng)偶聯反應。最後(hòu)通過純化(huà)步(bù)驟(zhòu)去除未(wèi)反(fǎn)應(yīng)的物質,得(dé)到可(kě)替(tì)寧(níng)-牛血清(qīng)蛋(dàn)白共軛(è)物。
關於(yú)我們:
陝西星貝愛科生(shēng)物科技(jì)經營的產品種(zhǒng)類包括有:合成(chéng)磷(lín)脂(zhī),高(gāo)分子聚(jù)乙(yǐ)二(èr)醇(chún)衍生物,嵌(qiàn)段(duàn)共聚物(wù),磁性納(nà)米(mǐ)顆(kē)粒,納(nà)米金(jīn)及(jí)納米金棒(bàng),近紅(hóng)外熒光(guāng)染(rǎn)料,活性熒光染料(liào),熒光(guāng)標記物(wù),蛋白(bái)交聯劑(jì),小(xiǎo)分(fēn)子(zǐ)PEG衍生物(wù),點(diǎn)擊(jī)化學(xué)產品(pǐn),樹枝狀聚合物(wù),環(huán)糊(hū)精衍生(shēng)物,大(dà)環(huán)配(pèi)體(tǐ)類,熒(yíng)光(guāng)量(liáng)子點(diǎn),透明質(zhì)酸衍生物,石墨(mò)烯(xī)或氧化石(shí)墨烯,碳納(nà)米(mǐ)管,富勒烯,二(èr)氧(yǎng)化(huà)矽(guī)及(jí)介孔二氧化矽,聚合(hé)物(wù)微(wēi)球(qiú),近(jìn)紅(hóng)外熒光染(rǎn)料,聚(jù)苯(běn)乙烯(xī)微球,上轉換納米發(fā)光顆粒,MRI核磁造影(yǐng)產品(pǐn),熒光蛋白及熒光探針(zhēn)等等。
溫(wēn)馨(xīn)提(tí)示:供應產品(pǐn)僅(jǐn)用於科研,不(bù)能(néng)用於人體!
相(xiāng)關(guān)產品:
大黃素-生物素(sù),Emodin-BIOTIN
生物素標(biāo)記(jì)岩藻多糖,Biotin-Fucoidan
Protein A-BIOTIN,蛋白A修飾(shì)生物素
纖(xiān)維二糖-生(shēng)物素,D-(+)-Cellobiose-biotin
維(wéi)生(shēng)素A酸-生(shēng)物素,Retinoic acid-BIOTIN
甘氨鵝脫氧(yǎng)膽(dǎn)酸-生物素(sù),Biotin-Glycochenodeoxycholic Acid
水蘇(sū)糖(táng)-生物素,STACHYOSE-BIOTIN
生物素(sù)-3-羥基丁酸,Biotin-3-hydroxybutyric acid
Spermine-biotin,精胺(àn)-生(shēng)物素
水飛(fēi)薊賓(bīn)-生(shēng)物(wù)素(sù),SILYBIN-BIOTIN

