雌二(èr)醇-雞卵清蛋白(bái)共軛的(dí)製(zhì)備方法(fǎ)有哪些
2025-05-21
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雌(cí)二醇-雞卵(luǎn)清(qīng)蛋白(bái)共軛(è)的製備方(fāng)法(fǎ)主(zhǔ)要(yào)有以下(xià)幾種:
碳(tàn)二亞(yà)胺法
原理(lǐ):碳二亞胺(àn)類化合物(wù)作為脫(tuō)水(shuǐ)劑,促(cù)進羧基和氨(ān)基(jī)之間(jiān)形(xíng)成(chéng)酰(xiān)胺(àn)鍵。雌二醇分子中(zhōng)存在(zài)羧(suō)基等活性基(jī)團,雞(jī)卵(luǎn)清蛋白上有(yǒu)豐(fēng)富的氨基,利用(yòng)碳(tàn)二亞(yà)胺(àn)使兩(liǎng)者(zhě)發生縮(suō)合(hé)反(fǎn)應(yīng),從(cóng)而(ér)實(shí)現偶(ǒu)聯(lián)。
步(bù)驟(zhòu):首(shǒu)先將雌二(èr)醇和(hé)雞(jī)卵(luǎn)清蛋白分(fēn)別溶(róng)解在(zài)合適的緩(huǎn)衝液中,然後將碳二(èr)亞胺試劑(如(rú)EDC,即(jí)1-乙基-(3-二甲基(jī)氨基丙基(jī))碳二(èr)亞胺鹽(yán)酸鹽)加入(rù)到雌二醇溶液中,活化(huà)一段(duàn)時間(jiān)後,將(jiāng)活(huó)化後的雌二醇溶(róng)液(yè)緩慢滴(dī)加(jiā)到(dào)雞(jī)卵清蛋(dàn)白(bái)溶液中,在一定的溫(wēn)度和pH條件(jiàn)下(xià)攪拌(bàn)反應數(shù)小(xiǎo)時(shí)。反(fǎn)應(yīng)結(jié)束(shù)後(hòu),通(tōng)過(guò)透(tòu)析或凝膠(jiāo)過濾等方(fāng)法去(qù)除未反應的物(wù)質(zhì)和雜質(zhì),得到(dào)雌二(èr)醇(chún)-雞卵清(qīng)蛋(dàn)白(bái)共(gòng)軛物。
戊二醛法
原理(lǐ):戊(wù)二醛(quán)是(shì)一種雙功(gōng)能(néng)交聯(lián)劑(jì),能(néng)夠與蛋(dàn)白質(zhì)分子(zǐ)中的(dí)氨(ān)基(jī)發生(shēng)反應,形(xíng)成席夫(fū)鹼結(jié)構(gòu),從(cóng)而將(jiāng)兩(liǎng)個(gè)蛋(dàn)白質分子連(lián)接起(qǐ)來(lái)。
步(bù)驟:把雞卵(luǎn)清蛋白溶解在緩(huǎn)衝液(yè)中(zhōng),加(jiā)入(rù)適(shì)量(liáng)的戊二醛溶液,在一定溫度(dù)下攪(jiǎo)拌反(fǎn)應(yīng)一(yī)段時間,使雞卵清蛋白(bái)分子之(zhī)間發生(shēng)輕(qīng)度(dù)交(jiāo)聯,這(zhè)樣可以增加蛋(dàn)白的反應(yīng)活(huó)性位點。然後將雌二醇(chún)加(jiā)入(rù)到上述反應(yīng)體(tǐ)係中,繼(jì)續在(zài)適宜(yí)的(dí)條(tiáo)件下反應數(shù)小時。反應(yīng)完(wán)成後(hòu),同(tóng)樣需要(yào)進(jìn)行(háng)純化處理,以獲得純淨的共軛物(wù)。
活(huó)性酯法(fǎ)
原(yuán)理:先將雌(cí)二(èr)醇轉化為活(huó)性酯形式(shì),活性酯(zhǐ)能夠與雞(jī)卵(luǎn)清蛋(dàn)白(bái)上的(dí)氨基(jī)快(kuài)速(sù)反(fǎn)應,形(xíng)成(chéng)穩定(dìng)的酰(xiān)胺鍵(jiàn),完(wán)成(chéng)偶(ǒu)聯(lián)。
步(bù)驟(zhòu):使用如N-羥基(jī)琥(hǔ)珀酰(xiān)亞胺(àn)(NHS)等試劑(jì)與雌(cí)二(èr)醇反應(yīng),生(shēng)成雌(cí)二醇的活性(xìng)酯(zhǐ)衍生(shēng)物。將(jiāng)雞卵清(qīng)蛋白(bái)溶解在合適的緩(huǎn)衝液中,再將製(zhì)備(bèi)好(hǎo)的雌二醇活(huó)性酯衍(yǎn)生(shēng)物緩(huǎn)慢加入(rù)到雞卵清蛋白溶(róng)液中,在一定(dìng)的溫(wēn)度和pH條件(jiàn)下反應數(shù)小時(shí),使兩者發生(shēng)偶(ǒu)聯反(fǎn)應。最後(hòu)通過純(chún)化(huà)步驟(zhòu)去(qù)除未反應的物質(zhì),得到雌(cí)二醇-雞卵清蛋(dàn)白共(gòng)軛物(wù)。
關於我(wǒ)們:
陝(shǎn)西星貝愛科(kē)生(shēng)物科技經營的(dí)產(chǎn)品種(zhǒng)類包(bāo)括(kuò)有:合成磷(lín)脂(zhī),高分(fēn)子聚乙(yǐ)二醇(chún)衍生物,嵌(qiàn)段共(gòng)聚(jù)物,磁性納米顆粒,納米(mǐ)金及(jí)納米(mǐ)金(jīn)棒(bàng),近紅(hóng)外熒光(guāng)染料,活(huó)性熒(yíng)光染料(liào),熒光標(biāo)記(jì)物,蛋(dàn)白交聯劑,小分(fēn)子PEG衍生物(wù),點擊化(huà)學(xué)產(chǎn)品,樹(shù)枝(zhī)狀(zhuàng)聚合物(wù),環(huán)糊精(jīng)衍(yǎn)生(shēng)物,大環(huán)配(pèi)體(tǐ)類,熒光量子點,透明(míng)質酸衍生物(wù),石墨(mò)烯或(huò)氧(yǎng)化石墨烯,碳納米管,富勒烯(xī),二氧化矽(guī)及介(jiè)孔二氧化矽,聚合(hé)物微球(qiú),近紅(hóng)外(wài)熒光染料(liào),聚苯(běn)乙烯(xī)微球,上轉換納米(mǐ)發光顆(kē)粒,MRI核磁造影產(chǎn)品,熒(yíng)光蛋(dàn)白及熒(yíng)光(guāng)探針等(děng)等(děng)。
溫(wēn)馨提示:供(gōng)應產(chǎn)品僅用(yòng)於科研(yán),不(bù)能用於人(rén)體!
相(xiāng)關(guān)產(chǎn)品(pǐn):
肝素鈉(nà)-生物(wù)素(sù),Heparinsodium-Biotin
生物(wù)素-聚蔗(zhè)糖(táng),BIOTIN-Polysucrose
Galactose-Biotin,半乳糖-生物素
Biotin-L-fucose,生(shēng)物素-岩(yán)藻(zǎo)糖(táng)
Biotin-Sialicacid,生物素(sù)-唾液酸
生物素-3-羥(qiǎng)基丁酸(suān)鈉,Biotin-DL-3-Hydroxybutyric acid sodium salt
毛(máo)蘭素-生(shēng)物(wù)素
異(yì)龍腦(nǎo)-生物素,DL-Isoborneol-Biotin
生物(wù)素-鹽(yán)酸(suān)舍曲林,Biotin-SETRALINE HCL
甘(gān)露聚糖修(xiū)飾生(shēng)物(wù)素(sù),MANNAN-biotin
生(shēng)物素標(biāo)記白皮杉醇(chún),Biotin-PICEATANNOL

