氨丙啉-過(guò)氧(yǎng)化物酶標記(jì)物的製備方法(fǎ)主要有以(yǐ)下(xià)幾(jī)種(zhǒng)：

戊二醛二步法

• 原理(lǐ)：戊二醛(quán)為一(yī)種(zhǒng)雙功能(néng)試(shì)劑(jì)，通(tōng)過(guò)其醛(quán)基(jī)分別(bié)與酶(méi)和(hé)免疫(yì)球蛋白上(shàng)的氨基(jī)共價結(jié)合(hé)，形成(chéng)酶-戊(wù)二醛-抗體結(jié)合(hé)物(wù)。

• 步驟：

• 取一定量的(dí)過氧化物(wù)酶(méi)（如辣(là)根過氧化(huà)物(wù)酶(méi)，HRP），用0.1M的PBS（pH6.8）溶(róng)解，配製(zhì)成一(yī)定(dìng)濃(nóng)度的酶(méi)溶(róng)液(yè)。

• 向(xiàng)酶溶液中(zhōng)加(jiā)入(rù)適量的(dí)戊(wù)二醛，使其終濃度為(wéi)0.05% - 0.1%，室溫下(xià)攪拌(bàn)反應(yīng)1 - 2小(xiǎo)時。

• 反應(yīng)結束後(hòu)，用(yòng)PBS透析或超濾除去(qù)未(wèi)反應(yīng)的戊二醛。

• 取一(yī)定量(liáng)的(dí)氨(ān)丙(bǐng)啉(lán)，用(yòng)0.1M的(dí)PBS（pH7.2）溶(róng)解(jiě)，配製成一(yī)定濃度(dù)的氨丙啉溶液。

• 將(jiāng)上(shàng)述(shù)處理後的酶溶(róng)液與氨(ān)丙(bǐng)啉溶液混合，室溫下攪拌(bàn)反(fǎn)應2 - 4小時(shí)。

• 反應(yīng)結束後(hòu)，用(yòng)PBS透(tòu)析或超濾除去未(wèi)反(fǎn)應(yīng)的氨丙啉，得到氨(ān)丙啉(lán)-過(guò)氧化物(wù)酶標記物(wù)。

過(guò)碘酸(suān)鈉(nà)法

• 原理：過碘(diǎn)酸鈉(nà)可將(jiāng)HRP分子表(biǎo)麵的(dí)糖鏈(liàn)氧化(huà)，形(xíng)成(chéng)醛基(jī)，再與氨丙啉上(shàng)的氨(ān)基(jī)結(jié)合，形成標(biāo)記(jì)物。

• 步(bù)驟(zhòu)：

• 取(qǔ)一定量的(dí)HRP，用0.1M的(dí)PBS（pH6.8）溶(róng)解，配(pèi)製成一定濃(nóng)度的(dí)酶(méi)溶(róng)液(yè)。

• 向(xiàng)酶溶液中(zhōng)加(jiā)入適量(liáng)的過碘酸鈉，使其(qí)終(zhōng)濃度(dù)為0.05% - 0.1%，室(shì)溫(wēn)下攪拌反應30 - 60分鐘。

• 反(fǎn)應結束後，用(yòng)PBS透析(xī)或(huò)超濾除去未反(fǎn)應(yīng)的過(guò)碘酸鈉(nà)。

• 取(qǔ)一(yī)定(dìng)量的氨丙啉，用(yòng)0.1M的PBS（pH7.2）溶(róng)解(jiě)，配製(zhì)成(chéng)一(yī)定(dìng)濃度(dù)的氨丙(bǐng)啉溶液。

• 將上(shàng)述處(chǔ)理後(hòu)的(dí)酶(méi)溶液與(yǔ)氨(ān)丙(bǐng)啉溶(róng)液混(hùn)合(hé)，室(shì)溫下攪(jiǎo)拌(bàn)反(fǎn)應(yīng)2 - 4小時。

• 反應(yīng)結束後(hòu)，用PBS透(tòu)析(xī)或(huò)超(chāo)濾除(chú)去未反應的氨丙(bǐng)啉，得到氨丙(bǐng)啉(lán)-過氧化物酶(méi)標記物。

碳(tàn)二亞(yà)胺法

• 原(yuán)理(lǐ)：碳二亞胺(àn)可(kě)活化(huà)HRP分子(zǐ)上的羧基(jī)，使(shǐ)其(qí)與(yǔ)氨丙(bǐng)啉上的(dí)氨基形成酰胺(àn)鍵(jiàn)，從(cóng)而實現標記。

• 步驟(zhòu)：

• 取一(yī)定(dìng)量的HRP，用0.1M的PBS（pH6.8）溶解，配(pèi)製(zhì)成(chéng)一定(dìng)濃度的酶溶液。

• 向酶溶液中加入適(shì)量(liáng)的碳(tàn)二亞(yà)胺(àn)（如(rú)EDC），使其終(zhōng)濃度為0.05% - 0.1%，室(shì)溫(wēn)下攪拌反應1 - 2小(xiǎo)時。

• 反應(yīng)結束後(hòu)，用PBS透(tòu)析或超(chāo)濾(lǜ)除去未反(fǎn)應的(dí)碳(tàn)二(èr)亞胺。

• 取一(yī)定(dìng)量的氨(ān)丙啉(lán)，用0.1M的PBS（pH7.2）溶解(jiě)，配製成一(yī)定濃度的(dí)氨(ān)丙(bǐng)啉溶(róng)液(yè)。

• 將上(shàng)述(shù)處(chǔ)理(lǐ)後(hòu)的酶溶液與(yǔ)氨丙啉溶液混(hùn)合(hé)，室溫(wēn)下攪(jiǎo)拌反應2 - 4小時。

• 反應結(jié)束(shù)後(hòu)，用(yòng)PBS透(tòu)析(xī)或(huò)超(chāo)濾除(chú)去未反應的(dí)氨丙啉，得到氨(ān)丙啉(lán)-過氧化(huà)物酶標(biāo)記(jì)物。

關於我們(mén):

陝西(xī)星(xīng)貝(bèi)愛(ài)科生物科技經營的(dí)產(chǎn)品(pǐn)種類包括(kuò)有(yǒu)：合(hé)成磷(lín)脂，高分子(zǐ)聚乙二醇衍生物(wù)，嵌(qiàn)段(duàn)共(gòng)聚(jù)物(wù)，磁性(xìng)納米(mǐ)顆粒(lì)，納米金及(jí)納米金棒(bàng)，近(jìn)紅外(wài)熒(yíng)光染(rǎn)料(liào)，活(huó)性熒光(guāng)染(rǎn)料(liào)，熒光標(biāo)記物，蛋(dàn)白交聯劑，小分子PEG衍(yǎn)生物，點擊(jī)化學產品(pǐn)，樹枝狀(zhuàng)聚合(hé)物(wù)，環(huán)糊精(jīng)衍生(shēng)物，大(dà)環配體(tǐ)類，熒光(guāng)量子(zǐ)點(diǎn)，透(tòu)明質酸(suān)衍(yǎn)生物，石墨(mò)烯(xī)或氧化石墨(mò)烯，碳納米管(guǎn)，富(fù)勒(lè)烯，二氧化矽(guī)及介孔二氧(yǎng)化(huà)矽，聚合(hé)物微球(qiú)，近紅(hóng)外熒光(guāng)染料，聚(jù)苯(běn)乙烯微球(qiú)，上(shàng)轉換納米發(fā)光顆粒，MRI核磁(cí)造影(yǐng)產品，熒光(guāng)蛋(dàn)白及熒光探(tàn)針等等。

溫(wēn)馨提示(shì)：供應(yīng)產品僅用於科(kē)研(yán)，不能(néng)用(yòng)於(yú)人(rén)體！

相(xiāng)關產(chǎn)品：

肼屈(qū)嗪-對苯(běn)二甲(jiǎ)醛，Hydralazine-Terephthalaldehyde

Dextran-BSA 葡聚(jù)糖(táng)修飾(shì)牛血(xiě)清白蛋白

半(bàn)乳糖(táng)化牛(niú)血清(qīng)白(bái)蛋(dàn)白(bái)(Galactose-BSA)

Mannose-BSA 甘露糖修(xiū)飾牛血(xiě)清白(bái)蛋白(bái)

Ad-MAL 金剛烷(wán)修(xiū)飾馬(mǎ)來(lái)酰(xiān)亞胺

BSA-Alkyne，炔(quē)基修飾的牛血清(qīng)白(bái)蛋白

Hyaluronate-Biotin，透(tòu)明質酸(suān)-生物素(sù)

streptavidin-Acrylamide 鏈(liàn)黴(méi)親(qīn)和素修飾丙烯酰胺

組胺偶(ǒu)聯牛血清(qīng)蛋白Histamine-BSA

DOX-MAL,馬(mǎ)來(lái)酰(xiān)亞胺功能化(huà)阿黴(méi)素