膽(dǎn)鈣(gài)化(huà)醇-雞卵清白(bái)蛋(dàn)白偶(ǒu)聯(lián)物的製備(bèi)方(fāng)法(fǎ)主(zhǔ)要(yào)有(yǒu)以下幾種：

過(guò)碘(diǎn)酸(suān)鹽(yán)氧化法

• 原理：過碘(diǎn)酸鈉(nà)將辣根(gēn)過氧化(huà)物酶（HRP）分(fēn)子表(biǎo)麵的多糖(táng)氧(yǎng)化(huà)為醛(quán)基(jī)，醛基與(yǔ)膽鈣化(huà)醇(chún)分子(zǐ)上(shàng)的(dí)氨(ān)基(jī)形(xíng)成(chéng)Schiff鹼(jiǎn)而結合，後者可(kě)進一步(bù)用NaBH₄（或乙(yǐ)醇胺）還(huán)原生成穩(wěn)定(dìng)的酶(méi)標(biāo)記(jì)物。

• 操(cāo)作步驟(zhòu)：

• 將(jiāng)HRP溶(róng)解在(zài)適(shì)量的(dí)緩衝溶(róng)液中(zhōng)，加入過碘酸鈉(nà)溶(róng)液(yè)，在一定(dìng)溫(wēn)度下(xià)避(bì)光反應(yīng)一段時間，使(shǐ)HRP表(biǎo)麵(miàn)的多(duō)糖(táng)被氧化(huà)為醛基。

• 將(jiāng)膽(dǎn)鈣化醇溶(róng)解(jiě)在(zài)合(hé)適的(dí)有機溶劑中(zhōng)，加入(rù)到上述(shù)氧(yǎng)化(huà)後的(dí)HRP溶(róng)液(yè)中，在(zài)鹼(jiǎn)性條(tiáo)件(jiàn)下(xià)反(fǎn)應，使(shǐ)醛基(jī)與膽(dǎn)鈣(gài)化(huà)醇(chún)的氨基形(xíng)成Schiff鹼(jiǎn)。

• 加入(rù)NaBH₄溶(róng)液，在(zài)一定溫度(dù)下反(fǎn)應一(yī)段時(shí)間，將Schiff鹼還(huán)原為(wéi)穩定的(dí)共(gòng)價(jià)鍵，得到(dào)膽(dǎn)鈣化醇(chún)-過(guò)氧化物酶標記物。

• 對反應產物(wù)進(jìn)行(háng)透析或(huò)超(chāo)濾等純(chún)化操(cāo)作，去除(chú)未(wèi)反應的小分(fēn)子物(wù)質，得(dé)到純化的標(biāo)記(jì)物。

戊二醛交聯法(fǎ)

• 原理(lǐ)：戊(wù)二醛作為雙(shuāng)功(gōng)能交聯劑，可(kě)與HRP和膽鈣化(huà)醇(chún)分子上的(dí)氨基(jī)反應，形成穩定的(dí)交聯(lián)產物。

• 操作步(bù)驟：

• 將(jiāng)HRP和(hé)膽(dǎn)鈣化醇分別(bié)溶解(jiě)在適當(dāng)的(dí)緩衝溶液(yè)中。

• 向HRP溶液中加(jiā)入適量的(dí)戊二醛(quán)溶(róng)液(yè)，在一定(dìng)溫度下反應(yīng)一(yī)段(duàn)時間，使HRP分(fēn)子(zǐ)上的(dí)氨基與戊二(èr)醛的醛(quán)基反(fǎn)應。

• 將(jiāng)上(shàng)述(shù)反(fǎn)應液與(yǔ)膽(dǎn)鈣(gài)化醇溶液(yè)混(hùn)合(hé)，在一(yī)定(dìng)溫(wēn)度(dù)下(xià)繼(jì)續反應(yīng)，使戊二(èr)醛的另(lìng)一(yī)個醛基與膽鈣(gài)化(huà)醇分(fēn)子上(shàng)的氨(ān)基(jī)反應，形(xíng)成(chéng)交聯產(chǎn)物。

• 對(duì)反應(yīng)產物進行透(tòu)析或(huò)超(chāo)濾等純(chún)化(huà)操作，去(qù)除未反(fǎn)應(yīng)的戊二醛和(hé)其他小(xiǎo)分子(zǐ)物質，得(dé)到純(chún)化(huà)的(dí)膽鈣化(huà)醇-過氧(yǎng)化(huà)物酶(méi)標(biāo)記物(wù)。

其他(tā)方法

• 直接(jiē)偶聯法(fǎ)：利用(yòng)某些化(huà)學試劑或(huò)酶(méi)促反(fǎn)應，將(jiāng)膽鈣化(huà)醇(chún)直接與(yǔ)HRP進行偶(ǒu)聯(lián)。例如，使(shǐ)用(yòng)N-羥(qiǎng)基琥(hǔ)珀酰亞胺酯（NHS）等(děng)活化(huà)試劑，將膽鈣化(huà)醇活(huó)化後與(yǔ)HRP分子上(shàng)的(dí)氨基(jī)反應，形(xíng)成(chéng)穩定(dìng)的偶聯物(wù)。

• 間(jiān)接偶聯法：通過引入(rù)中(zhōng)間(jiān)連(lián)接分子(zǐ)，如(rú)生(shēng)物(wù)素-親和(hé)素係統(tǒng)，將膽鈣(gài)化(huà)醇(chún)與(yǔ)HRP間接偶(ǒu)聯。首(shǒu)先將(jiāng)膽鈣(gài)化醇(chún)與生物素結合，然後利用親和素(sù)與(yǔ)生物(wù)素(sù)的特異性結(jié)合，將親和(hé)素(sù)標(biāo)記的HRP與(yǔ)生(shēng)物素化的膽鈣化(huà)醇結(jié)合，形成標記(jì)物(wù)。

關(guān)於我(wǒ)們(mén):

陝西(xī)星貝(bèi)愛科生物(wù)科(kē)技經營(yíng)的(dí)產品(pǐn)種類包(bāo)括有：合成磷(lín)脂
，高(gāo)分子(zǐ)聚(jù)乙(yǐ)二醇衍生物
，嵌(qiàn)段(duàn)共(gòng)聚(jù)物(wù)
，磁性納米(mǐ)顆粒
，納(nà)米(mǐ)金及納(nà)米(mǐ)金(jīn)棒(bàng)
，近(jìn)紅外熒(yíng)光染料
，活性熒光(guāng)染料
，熒(yíng)光標記物
，蛋(dàn)白(bái)交(jiāo)聯劑
，小分(fēn)子(zǐ)PEG衍(yǎn)生物
，點擊化(huà)學產(chǎn)品
，樹(shù)枝(zhī)狀聚合(hé)物
，環(huán)糊(hū)精(jīng)衍生物(wù)
，大環配(pèi)體類(lèi)
，熒(yíng)光(guāng)量(liáng)子點
，透明(míng)質(zhì)酸衍(yǎn)生物
，石墨(mò)烯或(huò)氧(yǎng)化石墨烯
，碳納(nà)米管
，富(fù)勒烯，二氧化(huà)矽及介孔二(èr)氧化矽(guī)，聚(jù)合物微球(qiú)，近紅(hóng)外(wài)熒光染(rǎn)料，聚苯乙烯微(wēi)球(qiú)，上轉換納(nà)米發光(guāng)顆粒(lì)，MRI核磁造(zào)影產品，熒(yíng)光(guāng)蛋(dàn)白及(jí)熒光(guāng)探針(zhēn)等等(děng)。

溫(wēn)馨(xīn)提(tí)示：供應產品(pǐn)僅(jǐn)用(yòng)於科(kē)研，不能用(yòng)於人體！

相(xiāng)關產(chǎn)品：

HRP-SH 巰(qiú)基(jī)修(xiū)飾(shì)的辣(là)根過氧化(huà)物酶 

HA-PBA透(tòu)明質(zhì)酸b標記(jì)苯(běn)硼酸(suān)

2-OA-BSA 2-辛炔(quē)酸(suān)標記(jì)牛血清白(bái)蛋白

HRP-BSA，辣根過氧(yǎng)化(huà)物(wù)酶偶聯牛(niú)血(xiě)清(qīng)白蛋白(bái)

DBCO-PEG1000-OVA

鏈黴親和素-吖(yā)啶酯，SA-AE

TSA-吖(yā)啶酯,酪(lào)氨(ān)酰胺(àn)-AE

FITC-OVA-DBCO

HRP-Alkyne，炔基修(xiū)飾辣(là)根(gēn)過氧化物酶(méi)

N3-HRP，疊(dié)氮(dàn)化辣(là)根過(guò)氧化物酶(méi)