cas：149838-22-2，FM 1-43是一(yī)種廣泛應用(yòng)於(yú)神經科(kē)學和細胞生(shēng)物學研(yán)究的(dí)熒光探針(zhēn)，其(qí)核心特(tè)性，應用場(cháng)景及(jí)操作要點(diǎn)如下：

化(huà)學本質與(yǔ)基(jī)本(běn)性(xìng)質(zhì)

• 化學名稱：N-(3-三(sān)乙基銨(ǎn)丙基)-4-(4-(二(èr)丁(dīng)基(jī)氨基(jī))苯乙烯基)吡(pǐ)啶(dìng)二(èr)溴鹽

• 分(fēn)子(zǐ)量：611.54 g/mol

• CAS號(hào)：149838-22-2

• 外(wài)觀：橙(chéng)色(sè)至(zhì)紅色(sè)固(gù)體

結構式：

• 溶解性(xìng)：

• 水溶性：可溶於水(shuǐ)，但需(xū)注意(yì)吸濕性（建議使用新開封的DMSO助(zhù)溶(róng)）。

• 有機溶(róng)劑：易溶於DMSO（溶解(jiě)度可達50 mg/mL，需超聲助(zhù)溶(róng)並(bìng)控製溫(wēn)度<60℃）。

• 儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：

• 短(duǎn)期：4℃密封避(bì)光保存(cún)（避免反復凍融）。

• 長(cháng)期：-80℃保存（6個月內使用(yòng)），-20℃保(bǎo)存(cún)（1個月(yuè)內(nèi)使用）。

熒光特(tè)性(xìng)

• 激發(fā)/發(fā)射(shè)波長(cháng)：

• 溶劑中：Ex 480 nm，Em 626-636 nm（橙紅色熒(yíng)光(guāng)）。

• 膜(mó)結合後：Em 565-590 nm（黃(huáng)色熒光(guāng)，Stokes位移(yí)大(dà)，需長通發射濾(lǜ)光(guāng)片）。

• 熒(yíng)光(guāng)行為：

• 水溶液中幾乎(hū)不發光(guāng)，插入(rù)細胞膜(mó)後熒光(guāng)顯著增強。

• 膜(mó)結合後熒光(guāng)光譜(pǔ)藍移，便於(yú)與背景信號區(qū)分。

核心(xīn)應用場(cháng)景

1. 神經科(kē)學研究(jiū)：

• 突觸囊泡循(xún)環：標(biāo)記主動(dòng)釋放(fàng)神(shén)經遞質(zhì)的(dí)神經(jīng)元，通(tōng)過內(nèi)化(huà)進入(rù)可(kě)回收(shōu)突觸囊(náng)泡，實現神(shén)經末梢(shāo)高(gāo)亮度染(rǎn)色。

• 機械轉導通道(dào)研究：作為毛細(xì)胞機(jī)械(xiè)傳遞通(tōng)道的(dí)滲透阻(zǔ)滯(zhì)劑，用(yòng)於(yú)耳毒(dú)性(xìng)機製(zhì)研究(jiū)（如降低氨基糖苷類(lèi)抗(kàng)生素的耳(ěr)毒(dú)性(xìng)）。

• 活性(xìng)依(yī)賴性機(jī)製：結(jié)合KCl刺激法(fǎ)，動態追蹤突觸(chù)小泡的(dí)釋放與(yǔ)回(huí)收(shōu)。

2. 細胞(bāo)生(shēng)物學研(yán)究：

• 細胞膜通透(tòu)性檢測：通過熒光(guāng)強度反(fǎn)映細(xì)胞(bāo)膜的通(tōng)透性和(hé)流動性(xìng)。

• 膜電(diàn)位(wèi)研(yán)究：敏(mǐn)感反映細胞膜(mó)電位變化，用(yòng)於(yú)檢測神(shén)經(jīng)細(xì)胞興奮性和(hé)離(lí)子(zǐ)通道功能。

3. 成像(xiàng)技術兼(jiān)容性(xìng)：

• 適用於熒光(guāng)顯微鏡(jìng)，共(gòng)聚焦顯微(wēi)鏡(jìng)，流式細胞儀(yí)，微(wēi)孔板讀數儀等(děng)設(shè)備(bèi)。

實(shí)驗操(cāo)作要(yào)點

1. 工作(zuò)液配製：

• 儲(chǔ)備(bèi)液：用(yòng)DMSO配製5 mM儲備(bèi)液（需超(chāo)聲(shēng)助(zhù)溶(róng)）。

• 工(gōng)作(zuò)液：用(yòng)預熱HBSS溶液稀釋至(zhì)5-20 μM（現(xiàn)用現配）。

2. 細胞標記(jì)流(liú)程(chéng)：

• 懸(xuán)浮(fú)細胞：

• 貼(tiē)壁細(xì)胞：

1. 培(péi)養(yǎng)於無(wú)菌(jūn)蓋玻(bō)片上，移除(chú)培養基後加(jiā)入100 μL染料(liào)工(gōng)作液。

2. 孵(fū)育5-30分鐘(zhōng)後，用培(péi)養(yǎng)基(jī)洗滌2-3次(cì)，成像觀(guān)察。

3. 離(lí)心收(shōu)集(jí)細胞，PBS洗(xǐ)滌兩(liǎng)次。

4. 加入1 mL FM 1-43工作液，室溫孵育5-30分(fēn)鐘(zhōng)。

5. 離心棄上清(qīng)，PBS洗滌(dí)兩(liǎng)次後重懸，用(yòng)於成像。

3. 非(fēi)特(tè)異性(xìng)染色去(qù)除(chú)：

• 標(biāo)記後通(tōng)過洗滌(dí)（如(rú)PBS或培養基(jī)）輕鬆(sōng)去除(chú)細胞表麵(miàn)非(fēi)特異性結(jié)合(hé)的(dí)染料。

4. 固定樣本(běn)處(chǔ)理：

• 若(ruò)需固(gù)定樣本，選(xuǎn)擇(zé)FM 1-43FX（醛(quán)類(lèi)固(gù)定(dìng)劑兼容(róng)版(bǎn)本），避(bì)免(miǎn)普通FM 1-43在(zài)固定過(guò)程(chéng)中(zhōng)丟失(shī)信(xìn)號(hào)。

注(zhù)意事項

• 毒性：對細胞(bāo)無毒，但需避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)導致降(jiàng)解(jiě)。

• 避(bì)光操(cāo)作(zuò)：熒光探(tàn)針(zhēn)對光敏感，所有(yǒu)步驟(zhòu)需(xū)在避光條件下進行(háng)。

• 設(shè)備兼容(róng)性(xìng)：使用典(diǎn)型(xíng)熒(yíng)光素(sù)（如FITC）或(huò)GFP光學濾光片組，但需注意其發(fā)射光譜與四甲(jiǎ)基(jī)羅丹(dān)明(míng)（TRITC）濾(lǜ)光片不兼容(róng)。

cas：149838-22-2，FM 1-43

關(guān)於我(wǒ)們(mén):

陝(shǎn)西星(xīng)貝愛科生物科技(jì)經(jīng)營(yíng)的(dí)產(chǎn)品(pǐn)種(zhǒng)類(lèi)包括(kuò)有：合(hé)成磷脂(zhī)，高分(fēn)子(zǐ)聚(jù)乙(yǐ)二醇衍生物(wù)，嵌段共聚(jù)物(wù)，磁性納米顆(kē)粒(lì)，納米金及納(nà)米金(jīn)棒，近紅外(wài)熒光染(rǎn)料，活(huó)性熒光染(rǎn)料，熒光標記(jì)物，蛋(dàn)白(bái)交聯劑，小分(fēn)子PEG衍(yǎn)生物(wù)，點(diǎn)擊化學產品，樹枝狀聚(jù)合物，環糊精衍(yǎn)生(shēng)物，大(dà)環(huán)配體類，熒(yíng)光(guāng)量子點(diǎn)，透明質酸衍生物，石墨烯(xī)或氧化(huà)石墨(mò)烯，碳(tàn)納米(mǐ)管，富勒(lè)烯，二氧(yǎng)化矽及介(jiè)孔二(èr)氧(yǎng)化矽，聚合(hé)物微球，近(jìn)紅外熒光染(rǎn)料(liào)，聚苯(běn)乙(yǐ)烯(xī)微(wēi)球，上(shàng)轉換納米發光(guāng)顆粒，MRI核磁造影產品，熒光蛋白及熒光(guāng)探針(zhēn)等等(děng)。

溫馨提示：供應(yīng)產(chǎn)品僅(jǐn)用於(yú)科(kē)研(yán)，不能用於人(rén)體！

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