Biotin-SS-NHS Ester 的作(zuò)用機理(lǐ)可(kě)概括為三步
：偶聯標(biāo)記 → 親和捕獲 → 還原(yuán)釋放(fàng)。

第(dì)一步(bù)
：偶聯標(biāo)記（NHS酯反應）

NHS酯是(shì)一種活化(huà)的(dí)羧(suō)基衍(yǎn)生物，在(zài) pH 7.0–8.5 條(tiáo)件下，目(mù)標分子(zǐ)上的伯(bó)氨基（-NH₂，如蛋(dàn)白質賴(lài)氨(ān)酸殘基的(dí)ε-氨基）作(zuò)為(wéi)親核試劑，攻(gōng)擊(jī)NHS酯(zhǐ)的羰基(jī)碳(tàn)，打開(kāi)琥(hǔ)珀(pò)酰亞(yà)胺(àn)環(huán)，形成(chéng)穩定的酰胺鍵（-CONH-）將生物素連接到目(mù)標分(fēn)子(zǐ)上(shàng)。NHS酯(zhǐ)極易水解(jiě)，必(bì)須現配(pèi)現用。

第二(èr)步
：親和捕獲(huò)（生(shēng)物素-鏈黴親和(hé)素結合）

偶(ǒu)聯完(wán)成後(hòu)，生物素(sù)端暴(bào)露(lòu)於溶液(yè)中。生物素能(néng)與鏈黴(méi)親(qīn)和(hé)素以較高(gāo)親(qīn)和力結合（Kd ≈ 10⁻¹⁵ M），將標記了生物(wù)素(sù)的目標分子(zǐ)特異(yì)性吸附(fù)到鏈黴(méi)親(qīn)和素磁(cí)珠或樹脂上，實現(xiàn)從(cóng)復雜樣(yàng)品中的(dí)高(gāo)效富集。分(fēn)子(zǐ)中約(yuē)24.3 Å的連(lián)接(jiē)臂(bì)有(yǒu)效減少(shǎo)了(liǎo)空(kōng)間位阻(zǔ)，保證(zhèng)結合效率(shuài)。

第(dì)三(sān)步(bù)
：還原釋放（雙硫鍵(jiàn)斷裂）

這(zhè)是(shì)該(gāi)試(shì)劑(jì)區別於普通不可(kě)逆生(shēng)物(wù)素(sù)化試(shì)劑的核心。連接(jiē)生物素與目(mù)標分子之(zhī)間的(dí)雙(shuāng)硫鍵(jiàn)（-S-S-）在氧化環境中穩定，但加入還(huán)原(yuán)劑(jì)（如(rú)DTT，BME或TCEP）後(hòu)，雙硫鍵(jiàn)被還原(yuán)斷裂(liè)為兩個巰基，目標分(fēn)子從親和(hé)載體(tǐ)上(shàng)溫(wēn)和釋(shì)放(fàng)。整(zhěng)個(gè)過(guò)程隻需5–50 mM DTT，室(shì)溫30–60分(fēn)鐘(zhōng)，無需SDS或尿(niào)素(sù)等強(qiáng)變(biàn)性劑(jì)，目標蛋(dàn)白活性完整(zhěng)保(bǎo)留。

關於我們(mén):

陝(shǎn)西星貝(bèi)愛科生(shēng)物科(kē)技(jì)經(jīng)營(yíng)的產(chǎn)品種(zhǒng)類包括有(yǒu)
：合成(chéng)磷脂(zhī)，高分(fēn)子(zǐ)聚(jù)乙二醇衍生物(wù)，嵌段共(gòng)聚物，磁(cí)性(xìng)納(nà)米顆粒，納米金及(jí)納米(mǐ)金棒，近(jìn)紅外(wài)熒光(guāng)染(rǎn)料，活性(xìng)熒光染料，熒光標記(jì)物，蛋(dàn)白交聯劑(jì)，小分子PEG衍(yǎn)生物，點擊化(huà)學產品，樹(shù)枝狀(zhuàng)聚合物，環(huán)糊精(jīng)衍(yǎn)生物，大環(huán)配(pèi)體類，熒(yíng)光(guāng)量(liáng)子點(diǎn)，透明質(zhì)酸衍(yǎn)生(shēng)物，石(shí)墨烯(xī)或氧化(huà)石(shí)墨烯(xī)，碳(tàn)納米管(guǎn)，富勒烯，二氧化矽(guī)及(jí)介(jiè)孔(kǒng)二氧化矽，聚合物微(wēi)球，近紅外(wài)熒(yíng)光(guāng)染料(liào)，聚(jù)苯(běn)乙(yǐ)烯(xī)微(wēi)球，上(shàng)轉換(huàn)納(nà)米(mǐ)發光(guāng)顆粒，MRI核(hé)磁造影產品，熒光蛋白及(jí)熒(yíng)光探(tàn)針(zhēn)等等。

溫(wēn)馨提示(shì)
：供(gōng)應(yīng)產(chǎn)品僅(jǐn)用於科研，不(bù)能(néng)用於人(rén)體！

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