Biotin-PEG11-PFP的用途
2026-05-11
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一(yī),蛋白(bái)質(zhì)與抗體(tǐ)生(shēng)物(wù)素化標記
PFP活(huó)性(xìng)酯基團能與蛋(dàn)白(bái)質賴氨酸(suān)殘基(jī)的ε-氨基(jī)和N端α-氨基(jī)發生(shēng)偶聯反(fǎn)應,形成穩定(dìng)的(dí)酰(xiān)胺(àn)鍵,將(jiāng)生(shēng)物(wù)素(sù)引(yǐn)入(rù)蛋(dàn)白質(zhì)或(huò)抗體表麵。標(biāo)記後(hòu)的蛋(dàn)白可(kě)配合(hé)Streptavidin-HRP,Streptavidin-FITC,Streptavidin-Cy3或(huò)Streptavidin-Cy5等進(jìn)行ELISA,Western blot,免疫(yì)熒(yíng)光(guāng)和(hé)流(liú)式細胞(bāo)術(shù)檢測(cè)。
PEG11鏈(liàn)(約488至(zhì)496Da,長度(dù)約20至(zhì)25Å)在(zài)此(cǐ)發揮關鍵作用(yòng)。相比(bǐ)短鏈PEG產(chǎn)品,PEG11提(tí)供更充(chōng)分的(dí)空間隔(gé)離(lí),大(dà)幅(fú)降(jiàng)低生物(wù)素(sù)與蛋白(bái)表(biǎo)麵之間的位阻(zǔ)效應(yīng),使生物素(sù)更容易被鏈黴親和(hé)素捕獲,結合效率(shuài)比無PEG臂的(dí)產品高數倍。同時(shí)PEG11的"隱形"效應(yīng)能有效減少標記蛋(dàn)白(bái)與(yǔ)其(qí)他(tā)分子的非(fēi)特(tè)異性結合,降(jiàng)低實驗背景(jǐng)信(xìn)號。標記(jì)後(hòu)蛋白活性保(bǎo)留率通(tōng)常(cháng)可達85%至(zhì)95%。
典型應用包括(kuò)抗(kàng)體(tǐ)標記用於免疫分(fēn)析,酶(méi)的生物(wù)素化用於(yú)親和(hé)層(céng)析(xī),受體(tǐ)蛋白標記(jì)用(yòng)於(yú)信(xìn)號(hào)通路研究(jiū)等(děng)。
二,蛋(dàn)白質(zhì)組(zǔ)學(xué)研(yán)究(jiū)
將Biotin-PEG11-PFP與細(xì)胞裂解(jiě)液(yè)中的蛋白質反(fǎn)應,生(shēng)物素化的(dí)蛋(dàn)白(bái)質可通(tōng)過鏈黴親(qīn)和素(sù)磁珠(zhū)高(gāo)效富集,再經(jīng)質(zhì)譜(pǔ)鑒(jiàn)定。這一(yī)策(cè)略(lüè)用於發現新的蛋(dàn)白(bái)質相(xiāng)互作用,鑒(jiàn)定生(shēng)物素(sù)結(jié)合蛋白或研(yán)究信號通路(lù)中(zhōng)的(dí)關鍵(jiàn)蛋白。
相(xiāng)比傳(chuán)統(tǒng)NHS酯法(fǎ),PFP酯的水解(jiě)穩定(dìng)性顯著(zhù)更(gēng)好(hǎo)(半(bàn)衰(shuāi)期長10至100倍),操作(zuò)窗口更(gēng)寬,標(biāo)記(jì)效率(shuài)更(gēng)高,背(bèi)景更(gēng)低(dī)。特別適合(hé)復雜樣品中(zhōng)低豐(fēng)度(dù)蛋白的(dí)捕獲和(hé)鑒(jiàn)定(dìng)。
三(sān),藥物(wù)傳遞與靶向(xiàng)遞(dì)送(sòng)係統
在(zài)藥物研發中,Biotin-PEG11-PFP可用於(yú)將藥(yào)物分子(zǐ)與靶(bǎ)向分子(zǐ)偶(ǒu)聯,實(shí)現(xiàn)藥物的靶向(xiàng)輸送和釋放(fàng)。利(lì)用(yòng)生物素與(yǔ)鏈黴親(qīn)和素的超高親(qīn)和力(Kd約10⁻¹⁵M),可構建(jiàn)"生物素(sù)-鏈(liàn)黴(méi)親和素-靶向配體"三級(jí)結構,將(jiāng)藥(yào)物精準遞(dì)送至特(tè)定細胞或組織(zhī)。
例如(rú)將Biotin-PEG11-PFP修飾於(yú)脂質體(tǐ)或(huò)納(nà)米顆粒(lì)表麵(miàn),通(tōng)過鏈黴親和素橋接靶向抗體(tǐ),實現(xiàn)腫(zhǒng)瘤(liú)細(xì)胞(bāo)的(dí)選(xuǎn)擇性富集,提高(gāo)療效(xiào)並降低全身(shēn)毒性。PEG11鏈(liàn)增強納(nà)米(mǐ)顆(kē)粒的(dí)水溶性(xìng)和(hé)體(tǐ)內(nèi)穩(wěn)定性(xìng),延長血(xiě)液循(xún)環(huán)時間,減少(shǎo)免(miǎn)疫係(xì)統清(qīng)除。
四(sì),納(nà)米(mǐ)材(cái)料(liào)表(biǎo)麵(miàn)功(gōng)能化
用於(yú)修(xiū)飾金納(nà)米(mǐ)顆粒,量子(zǐ)點,磁(cí)性納米(mǐ)顆(kē)粒(Fe₃O₄),脂(zhī)質體,PLGA納米(mǐ)粒等(děng)藥(yào)物載體表麵(miàn),賦予靶向(xiàng)識(shí)別(bié)能力(lì)。PEG11鏈增(zēng)強納米顆粒(lì)的(dí)生(shēng)物相容(róng)性(xìng),減少(shǎo)非(fēi)特異性蛋白(bái)吸附(fù)和免疫(yì)原性,延長(cháng)體內(nèi)循(xún)環時間。
通過(guò)生物素-鏈黴親(qīn)和素係統(tǒng),可進一(yī)步(bù)偶聯靶向(xiàng)配體(tǐ)(如轉鐵(tiě)蛋(dàn)白(bái),RGD肽(tài),抗(kàng)體等(děng)),實現腫瘤或(huò)炎(yán)症(zhèng)組(zǔ)織(zhī)的主(zhǔ)動靶(bǎ)向。也可(kě)用於構建診療一(yī)體化納(nà)米(mǐ)係統,將熒光(guāng)探(tàn)針或(huò)造影劑(jì)與(yǔ)納米載(zǎi)體結合,實(shí)現(xiàn)體內(nèi)可視(shì)化(huà)跟蹤。
五(wǔ),生(shēng)物傳感(gǎn)器構建(jiàn)
Biotin-PEG11-PFP可用(yòng)於(yú)構(gòu)建(jiàn)高靈敏(mǐn)度生(shēng)物(wù)檢測(cè)平(píng)台。將(jiāng)其修(xiū)飾到SPR芯片(piàn),電化學傳感器,石英晶體(tǐ)微(wēi)天平或(huò)光學(xué)傳感器表(biǎo)麵,PFP酯(zhǐ)的高反應活(huó)性(xìng)確保表麵(miàn)修飾效(xiào)率高,PEG11鏈減(jiǎn)少傳感器表麵非特異(yì)性吸附。
通(tōng)過(guò)生(shēng)物(wù)素與鏈黴親和(hé)素的特異性(xìng)結(jié)合實(shí)現信(xìn)號(hào)放(fàng)大,檢測靈敏度可比(bǐ)直(zhí)接標記(jì)提(tí)高(gāo)10至(zhì)100倍。可用(yòng)於(yú)檢(jiǎn)測(cè)蛋白質(zhì),核酸,小(xiǎo)分子(zǐ)代謝(xiè)物(wù)等(děng),應(yīng)用(yòng)於疾病診斷,環境監測(cè)和食品(pǐn)安(ān)全(quán)檢測(cè)。
也可(kě)開發(fā)分(fēn)子(zǐ)探(tàn)針,與量(liáng)子點或(huò)熒光染料結(jié)合,用於(yú)細胞(bāo)內pH,離子濃度或(huò)蛋(dàn)白質相互作用(yòng)的(dí)實時監測(cè)。
六,親和(hé)純化(huà)與(yǔ)富集
標記後的蛋(dàn)白(bái)或核酸可通(tōng)過(guò)鏈黴(méi)親和素磁珠或親和(hé)素(sù)柱(zhù)子進行高特(tè)異性(xìng)捕(bǔ)獲和(hé)純化。也(yě)可用於(yú)從復(fù)雜(zá)混(hùn)合物(wù)中(zhōng)富集低(dī)豐度(dù)的生物(wù)素(sù)化目標分子,如(rú)從血(xiě)清(qīng)中(zhōng)富集(jí)特定(dìng)蛋(dàn)白,從基(jī)因組DNA中(zhōng)富集(jí)生物素標(biāo)記的核酸(suān)片(piàn)段(duàn)。
在酶固定化技(jì)術(shù)中,將酶(méi)與Biotin-PEG11-PFP共價連接(jiē),再通過鏈黴親和(hé)素錨(máo)定於(yú)固相(xiāng)載(zǎi)體(tǐ),實現(xiàn)酶的重(zhòng)復使用(yòng)及(jí)反應(yīng)條(tiáo)件(jiàn)優(yōu)化。
七(qī),細胞(bāo)表(biǎo)麵標記與(yǔ)成像
可(kě)用(yòng)於活細(xì)胞或(huò)固(gù)定(dìng)細(xì)胞(bāo)表麵蛋(dàn)白(bái)的(dí)生(shēng)物素(sù)標記,配合(hé)熒(yíng)光標(biāo)記(jì)的(dí)鏈黴(méi)親和素進(jìn)行流式(shì)細胞(bāo)術分析(xī)或熒光(guāng)顯微鏡(jìng)成像。PEG11鏈(liàn)減少(shǎo)標記後蛋(dàn)白(bái)聚集(jí),保持(chí)細胞(bāo)表(biǎo)麵蛋(dàn)白(bái)的(dí)天(tiān)然構(gòu)象(xiàng)。
用於細(xì)胞(bāo)表(biǎo)麵(miàn)蛋白(bái)質組學研(yán)究,標(biāo)記並(bìng)分(fēn)離細胞(bāo)表(biǎo)麵(miàn)蛋白,研(yán)究(jiū)受體(tǐ)表達,內吞作(zuò)用及信號(hào)傳導(dǎo)。也可(kě)用於蛋白(bái)質-蛋白質相(xiāng)互作用研究,標記(jì)特定(dìng)表(biǎo)麵受體(tǐ)後利用(yòng)鏈(liàn)黴(méi)親和(hé)素珠(zhū)進行免疫共沉澱(diàn)。
八(bā),PROTAC連接子構(gòu)建
作為PROTAC(蛋(dàn)白降(jiàng)解(jiě)靶向嵌(qiàn)合(hé)體)的連(lián)接子(zǐ)組分,將目標(biāo)蛋白(bái)配體(tǐ)與E3泛(fàn)素連接酶配(pèi)體連接(jiē)。PEG11提(tí)供適當的柔性和長度(約20至25Å),有(yǒu)助(zhù)於(yú)兩端(duān)配體同(tóng)時(shí)結(jié)合(hé)各自(zì)靶標,形成穩(wěn)定的三(sān)元復(fù)合物(wù)誘(yòu)導(dǎo)靶(bǎ)蛋白(bái)泛(fàn)素化降解(jiě)。
相比剛性連(lián)接(jiē)子,PEG11鏈可(kě)減(jiǎn)少(shǎo)分(fēn)子構象限(xiàn)製(zhì),增強對不同靶(bǎ)蛋白的適應性,提升降解效率。PEG鏈還可優(yōu)化PROTAC分子的(dí)水溶性,影(yǐng)響細(xì)胞滲透(tòu)性。
九(jiǔ),基因(yīn)表達(dá)與(yǔ)核酸研究
可標記(jì)含氨(ān)基修飾的(dí)核酸(suān)探(tàn)針或引(yǐn)物(wù),用(yòng)於(yú)基因(yīn)芯片,原(yuán)位(wèi)雜交(jiāo)等實(shí)驗。生(shēng)物素標(biāo)記(jì)的核(hé)酸可(kě)通過鏈(liàn)黴(méi)親(qīn)和(hé)素係(xì)統(tǒng)進(jìn)行檢(jiǎn)測,捕獲或(huò)固(gù)定到(dào)芯(xīn)片(piàn)上,用(yòng)於(yú)基因(yīn)表達(dá)分(fēn)析,SNP檢測(cè)和(hé)表觀遺傳學研究。
十(shí),生物材料(liào)表麵改性
可(kě)用(yòng)於修(xiū)飾(shì)玻(bō)璃(lí)芯片,矽(guī)片(piàn),微流(liú)控器件通道(dào)等(děng)表麵(miàn),構建通(tōng)用(yòng)的生(shēng)物(wù)分子捕獲平台(tái)。PEG11鏈(liàn)提(tí)供(gōng)抗(kàng)汙性(xìng)和生物相容性,減(jiǎn)少通道內(nèi)非特異性(xìng)蛋白(bái)吸(xī)附,適用(yòng)於(yú)微(wēi)流(liú)控(kòng)芯(xīn)片(piàn)和(hé)即時(shí)檢測(POCT)設(shè)備。
也(yě)可用(yòng)於(yú)生物材(cái)料表(biǎo)麵(miàn)修飾,如(rú)水凝(níng)膠(jiāo),聚合物支架(jià),組織工(gōng)程(chéng)載體(tǐ)等(děng),賦予材料(liào)生物識(shí)別(bié)能(néng)力和(hé)靶(bǎ)向功(gōng)能。
關(guān)於(yú)我(wǒ)們(mén):
陝(shǎn)西星(xīng)貝(bèi)愛科生物科技經營的產品種類包(bāo)括有(yǒu):合(hé)成磷脂,高分(fēn)子聚乙二醇衍生(shēng)物,嵌段共聚物,磁性(xìng)納(nà)米(mǐ)顆粒,納米金(jīn)及(jí)納米金棒,近紅外(wài)熒(yíng)光染料,活(huó)性(xìng)熒(yíng)光染(rǎn)料(liào),熒(yíng)光標(biāo)記物,蛋(dàn)白交聯(lián)劑,小分(fēn)子(zǐ)PEG衍生(shēng)物(wù),點(diǎn)擊化學產品(pǐn),樹(shù)枝狀(zhuàng)聚合物,環糊(hū)精衍生(shēng)物(wù),大(dà)環(huán)配體類,熒(yíng)光量子點(diǎn),透明(míng)質酸(suān)衍生物,石墨(mò)烯(xī)或(huò)氧化石墨烯,碳(tàn)納米管,富(fù)勒烯(xī),二(èr)氧(yǎng)化矽及(jí)介孔二(èr)氧化矽,聚(jù)合(hé)物微(wēi)球(qiú),近紅(hóng)外熒光染(rǎn)料,聚苯乙(yǐ)烯微(wēi)球,上轉(zhuǎn)換納米(mǐ)發光顆粒(lì),MRI核(hé)磁(cí)造影產品,熒(yíng)光蛋白(bái)及熒光探針等(děng)等。
溫(wēn)馨(xīn)提(tí)示(shì):供(gōng)應(yīng)產(chǎn)品僅用(yòng)於(yú)科(kē)研(yán),不能(néng)用於人(rén)體!
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