Me-tetrazine-Cyanine3 是一種結(jié)合(hé)了(liǎo)甲(jiǎ)基四嗪（Me-tetrazine）高(gāo)反應活性與(yǔ)花(huā)青(qīng)素(sù) Cy3 優異熒光(guāng)性能(néng)的(dí)多(duō)功能探針分子(zǐ)
。具體介紹如(rú)下(xià)：

1. 生(shēng)物(wù)正(zhèng)交反應(yīng)性：

• 快(kuài)速反(fǎn)應：甲基四(sì)嗪基團能與反式(shì)環辛烯（TCO）或環丙(bǐng)烯（BCN）等配體發生逆(nì)電(diàn)子需求(qiú)狄爾(ěr)斯-阿(ā)爾(ěr)德反應（IEDDA），反(fǎn)應速率極(jí)快，速(sù)率常(cháng)數可(kě)達 103−106M−1s−1 量級(jí)
  。在生(shēng)理條件下（如 37°C），反(fǎn)應可(kě)在(zài)數分(fēn)鐘內完(wán)成(chéng)，無(wú)需(xū)銅(tóng)催(cuī)化(huà)劑或高(gāo)溫，生物相(xiāng)容(róng)性優異(yì)
  。

• 高選擇(zé)性：反應(yīng)具有高(gāo)度特異(yì)性，可在(zài)復雜生(shēng)物環(huán)境中(zhōng)標記(jì)目標(biāo)分子(zǐ)，避免幹擾其(qí)他生物(wù)過(guò)程(chéng)，適合活體(tǐ)應用
  。

2. 熒光性(xìng)能：

• 熒光(guāng)信號(hào)強(qiáng)：Cy3 染料的激發波(bō)長約 550 nm，發(fā)射波長(cháng)約(yuē) 570 nm，發射(shè)橙紅(hóng)色熒(yíng)光(guāng)，熒光(guāng)量子(zǐ)產率高(gāo)，肉眼可(kě)見(jiàn)，適(shì)合(hé)顯(xiǎn)微(wēi)鏡和(hé)流式細(xì)胞(bāo)術(shù)檢(jiǎn)測(cè)
  。

• 光(guāng)穩定性好：Cy3 染料(liào)具有(yǒu)良好(hǎo)的光穩(wěn)定性，支持(chí)長時(shí)間，高信噪比的成像，發射(shè)波(bō)長與(yǔ)常規顯(xiǎn)微鏡(jìng)濾光片匹配(pèi)，兼(jiān)容 532 nm 或(huò) 555 nm 激光(guāng)激(jī)發(fā)，可通過(guò) TRITC 濾(lǜ)片(piàn)觀(guān)察(chá)
  。

• pH 不敏感：熒光信號對 pH 不敏(mǐn)感，適合在(zài)多種生(shēng)理條(tiáo)件(jiàn)下(xià)使用
  。

3. 水溶(róng)性與生(shēng)物相容性(xìng)：

• 水(shuǐ)溶(róng)性提(tí)升(shēng)：部(bù)分 Me-tetrazine-Cyanine3 衍(yǎn)生物（如 Me-tetrazine-Disulfo-Cyanine3）含(hán)有(yǒu)雙磺酸(suān)基(jī)團(tuán)，顯(xiǎn)著(zhù)提(tí)升(shēng)其在水性生(shēng)物係(xì)統（如(rú)細胞培養，活體注射）中的(dí)溶(róng)解性，可在 PBS，DMEM 等常用生物緩衝(chōng)液(yè)中(zhōng)達到 1 mM 以上的(dí)可(kě)溶(róng)濃(nóng)度
  。

• 低(dī)細胞毒性：對(duì)細(xì)胞毒(dú)性(xìng)低(dī)，適合(hé)活細(xì)胞和活(huó)體動(dòng)物成像
  。

4. 模(mó)塊(kuài)化(huà)與通(tōng)用(yòng)性(xìng)設(shè)計：

• 靈(líng)活標記策(cè)略：支持“先(xiān)靶(bǎ)向，後標(biāo)記(jì)"的靈活策略
  。例(lì)如，可(kě)先將 TCO 修飾的靶(bǎ)向(xiàng)分(fēn)子（如抗體，多肽(tài)，核(hé)酸）引入(rù)實驗體係，再(zài)通(tōng)過 Me-tetrazine-Cyanine3 的(dí)快(kuài)速點擊反應實(shí)現(xiàn)特(tè)異(yì)性標(biāo)記，避免(miǎn)非特異性背(bèi)景幹(gān)擾(rǎo)
  。

• 多功能(néng)兼容：可與(yǔ)多(duō)種(zhǒng)靶向分子或功能(néng)模(mó)塊(kuài)（如(rú)藥(yào)物，成像探針）配對使用(yòng)，適(shì)配多樣化(huà)研究場景（如(rú)蛋白(bái)質組(zǔ)學，細(xì)胞生(shēng)物(wù)學，納米醫(yī)學(xué)）
  。

• 構建生(shēng)物傳感(gǎn)器：利用(yòng)甲基(jī)四嗪對 Cy3 的熒(yíng)光(guāng)淬(cuì)滅(miè)能力，可設計(jì)智能響(xiǎng)應式探(tàn)針(zhēn)
  。當(dāng) Me-tetrazine-Cyanine3 與 TCO 發生點擊(jī)反(fǎn)應後，四(sì)嗪(qín)結構被破壞(huài)，Cy3 的熒光得(dé)以(yǐ)恢復(fù)，實現目(mù)標(biāo)生物分(fēn)子的特(tè)異性檢(jiǎn)測和(hé)反應動(dòng)力學監(jiān)測(cè)
  。

5. 結構穩定(dìng)性與(yǔ)實(shí)驗重(zhòng)復性(xìng)：

• 化學穩(wěn)定(dìng)性(xìng)：Me-tetrazine-Cyanine3 在(zài)生理(lǐ)緩衝液(yè)中保(bǎo)持穩(wěn)定(dìng)，化(huà)合物保存期長，實(shí)驗重復性(xìng)好
  。

• 儲(chǔ)存方(fāng)便：建議在 -20°C 下幹燥，充(chōng)氮(dàn)，避光保存(cún)，避免反(fǎn)復凍融(róng)
  。溶(róng)解時推(tuī)薦使(shǐ)用無水 DMSO 配(pèi)製儲(chǔ)備(bèi)液（1-10 mM）
  。

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。

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