Cyanine3.5 DBCO 的(dí)製(zhì)備(bèi)方法主(zhǔ)要基於 Cyanine3.5 熒光(guāng)染料與 DBCO 基團(tuán)的共(gòng)價結合，核心(xīn)步(bù)驟包(bāo)括磺(huáng)化修飾(shì)，炔基引入及(jí)點(diǎn)擊(jī)化學(xué)反應(yīng)，具(jù)體如下：

一，Cyanine3.5 的(dí)磺化修飾(shì)

• 目(mù)的：提高 Cyanine3.5 的水溶(róng)性，便於(yú)後續(xù)生(shēng)物分子(zǐ)標(biāo)記
  。

• 方法：通(tōng)過(guò)磺化(huà)反應在(zài) Cyanine3.5 分子(zǐ)中(zhōng)引(yǐn)入磺(huáng)酸基(jī)團(tuán)（如三(sān)磺酸修飾），形(xíng)成(chéng)磺化 Cyanine3.5（trisulfo-Cy3.5）
  。

• 產物(wù)特性：磺(huáng)化後的(dí) Cyanine3.5 具(jù)有(yǒu)良好(hǎo)的(dí)水溶性，發射波長為(wéi) 604 nm，可(kě)用 561 nm 或(huò) 594 nm 激(jī)光(guāng)激發(fā)，與(yǔ) Texas Red® 濾(lǜ)光片兼容
  。

二，DBCO 基團的引(yǐn)入

• 目的：賦予 Cyanine3.5 生(shēng)物正交(jiāo)反應能力，實現與疊氮(dàn)化(huà)物的(dí)特異性結(jié)合
  。

• 方法：

• 直接合(hé)成：將(jiāng) DBCO 基(jī)團(tuán)通(tōng)過化學鍵(jiàn)（如酰胺(àn)鍵，醚(mí)鍵(jiàn)）直(zhí)接連(lián)接到(dào)磺化 Cyanine3.5 的(dí)分(fēn)子(zǐ)骨架上
  。

• 聚乙(yǐ)二(èr)醇(chún)（PEG）橋接：通過 PEG 鏈將 DBCO 基團與(yǔ)磺化 Cyanine3.5 連(lián)接，形(xíng)成 DBCO-PEG-Sulfo-Cy3.5
  。PEG 鏈可增加(jiā)化(huà)合物的(dí)柔韌性(xìng)和生物(wù)相(xiāng)容性，同時(shí)減(jiǎn)少空間位阻
  。

• 產物(wù)特性(xìng)：

• DBCO-trisulfo-Cy3.5：紫(zǐ)色(sè)固(gù)體，分(fēn)子式(shì)為 C59H58N4NaO11S3，分子量為(wéi) 1118.3
  。

• DBCO-PEG-Sulfo-Cy3.5：分子(zǐ)量(liáng)可根據 PEG 鏈長度調(tiáo)整(zhěng)（如 1k，2k，3.4k，5k，10k 等），純度 ≥95%
  。

三，點擊化(huà)學反(fǎn)應(yīng)（SPAAC）的應(yīng)用

• 目的：實現 Cyanine3.5 DBCO 與疊(dié)氮化物(wù)的特(tè)異性結(jié)合(hé)，用於(yú)生(shēng)物(wù)分(fēn)子標記
  。

• 方法：

• 反應條件：在(zài)中性或微鹼性(xìng)條件下，DBCO 基團與(yǔ)疊氮化物(wù)發(fā)生無銅點擊化學反應(yīng)（SPAAC），生成穩定的(dí)三唑環產物(wù)
  。

• 反(fǎn)應優勢(shì)：無需催化劑或額(é)外(wài)能量(liáng)輸入(rù)，反(fǎn)應條(tiáo)件(jiàn)溫和(hé)，生物相(xiāng)容性(xìng)好
  。

四，製備過程(chéng)中的關鍵(jiàn)控(kòng)製(zhì)點

• 磺化程度(dù)：需控製磺(huáng)化(huà)反應條件(jiàn)，確保 Cyanine3.5 的(dí)磺(huáng)化程(chéng)度(dù)適(shì)中(zhōng)，以(yǐ)平(píng)衡水溶性和(hé)熒光(guāng)性(xìng)能
  。

• 反(fǎn)應純度：在 DBCO 基(jī)團引(yǐn)入和(hé)點擊化學(xué)反應過(guò)程(chéng)中，需(xū)保(bǎo)持高(gāo)純度(dù)，避免(miǎn)副(fù)產(chǎn)物幹(gān)擾
  。

• 儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：Cyanine3.5 DBCO 需在(zài) -20°C 以(yǐ)下(xià)冰凍，幹燥，避(bì)光(guāng)保存，長(cháng)期保(bǎo)存(cún)時(shí)建(jiàn)議(yì)充(chōng)入惰(duò)性氣(qì)體(tǐ)（如(rú)氬氣(qì)或(huò)氮氣(qì)）保護(hù)
  。

關(guān)於(yú)我(wǒ)們(mén):

陝西(xī)星貝愛(ài)科生(shēng)物科(kē)技(jì)經營的產(chǎn)品種(zhǒng)類(lèi)包括有(yǒu)：合(hé)成(chéng)磷脂，高分子聚乙二醇(chún)衍生(shēng)物，嵌(qiàn)段共聚(jù)物，磁性納米顆粒，納(nà)米(mǐ)金及納(nà)米金(jīn)棒，近紅(hóng)外熒(yíng)光(guāng)染(rǎn)料(liào)，活(huó)性熒(yíng)光染(rǎn)料(liào)，熒光(guāng)標記(jì)物(wù)，蛋白交(jiāo)聯劑(jì)，小(xiǎo)分(fēn)子(zǐ)PEG衍生物(wù)，點擊(jī)化(huà)學(xué)產(chǎn)品，樹(shù)枝狀(zhuàng)聚合(hé)物(wù)，環糊精衍生(shēng)物(wù)，大環(huán)配體(tǐ)類(lèi)，熒光量子(zǐ)點(diǎn)，透(tòu)明質(zhì)酸(suān)衍生(shēng)物(wù)，石(shí)墨烯(xī)或(huò)氧(yǎng)化(huà)石(shí)墨烯(xī)，碳納(nà)米(mǐ)管，富(fù)勒烯(xī)，二(èr)氧(yǎng)化矽(guī)及(jí)介(jiè)孔二氧(yǎng)化矽，聚合物微球(qiú)，近紅外(wài)熒光(guāng)染(rǎn)料，聚(jù)苯乙烯微(wēi)球，上(shàng)轉(zhuǎn)換納米發光(guāng)顆(kē)粒(lì)，MRI核磁造影產(chǎn)品，熒光(guāng)蛋白及(jí)熒光(guāng)探針等(děng)等
。

溫馨提示：供(gōng)應(yīng)產(chǎn)品僅(jǐn)用於(yú)科(kē)研，不能(néng)用(yòng)於(yú)人體(tǐ)！

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