一，微(wēi)生物發酵法(fǎ)（主流工業化方法）

1. 大腸杆菌發(fā)酵(jiào)法

• 工藝流程：以食品級(jí)葡萄(táo)糖和玉(yù)米漿為原料，經大腸埃(āi)希氏菌（菌(jūn)株號SA-8）發(fā)酵，過濾(lǜ)，滅菌，水解，提純等(děng)步驟(zhòu)製成。

2. 枯草芽孢(bāo)杆菌(jūn)基(jī)因(yīn)工程(chéng)法

• 工藝(yì)特(tè)點：利用(yòng)基因工程(chéng)改(gǎi)造的枯草芽(yá)孢杆菌工程菌株(zhū)發酵(jiào)，產量達(dá)9.7g/L（3L發(fā)酵罐）。

二(èr)，化學合成(chéng)法(fǎ)

1. 傳統化學(xué)合(hé)成(chéng)

• 工藝(yì)流程：通過多(duō)步化學(xué)反應合成NANA，但(dàn)需(xū)繁瑣(suǒ)的基(jī)團保(bǎo)護(hù)與去保護(hù)操(cāo)作，且(qiě)易產生手性異構副(fù)產物。

2. 微波水解法

• 工藝(yì)流程：以聚唾液酸(suān)為(wéi)原料，用硫(liú)酸和磷酸混(hùn)合(hé)酸液(yè)在微波反(fǎn)應器(qì)中水解（如(rú)70℃，24min），經超(chāo)濾，蒸(zhēng)發結晶(jīng)等(děng)步驟得(dé)到(dào)NANA。

三(sān)，酶催化(huà)轉化(huà)法(fǎ)

1. 全細(xì)胞(bāo)生物催化

• 工藝(yì)流程：利(lì)用(yòng)重組(zǔ)大(dà)腸杆菌表(biǎo)達(dá)N-乙酰(xiān)葡(pú)萄糖胺-2-表異構酶(méi)等(děng)，將(jiāng)N-乙(yǐ)酰(xiān)葡萄(táo)糖胺(àn)和(hé)丙酮酸轉化(huà)為(wéi)NANA。

2. “一釜(fǔ)五酶法"

• 工藝(yì)創(chuàng)新(xīn)：以(yǐ)氨基葡萄糖為起(qǐ)始(shǐ)底物(wù)，通過(guò)五(wǔ)種酶(méi)催化(huà)合成(chéng)唾液酸及其(qí)類(lèi)似物(wù)，延伸了(liǎo)生(shēng)物全(quán)酶法(fǎ)生產通(tōng)路(lù)。

四(sì)，天然(rán)產物(wù)提(tí)取(qǔ)法

1. 雞蛋(dàn)殼膜提(tí)取

• 工藝流(liú)程：以雞蛋(dàn)殼(ké)膜為原(yuán)料(liào)，用(yòng)硫(liú)酸(suān)水(shuǐ)解(jiě)（0.05mol/L，80℃，2h），經乙(yǐ)醇沉(chén)澱(diàn)，離子(zǐ)交(jiāo)換(huàn)層(céng)析純化(huà)得(dé)到NANA。

2. 燕(yàn)窩(wō)提(tí)取(qǔ)

• 工藝特點：燕窩中NANA含量豐(fēng)富，但組分復雜，提取需(xū)結合酸，鹼或(huò)酶(méi)法。

五，其(qí)他創新方法

1. 聚唾(tuò)液酸(suān)發酵(jiào)水解(jiě)法(fǎ)

• 工(gōng)藝流(liú)程(chéng)：通過(guò)發酵(jiào)生(shēng)產(chǎn)聚唾液(yè)酸(suān)，再經(jīng)水(shuǐ)解(jiě)得(dé)到(dào)NANA。

2. 結晶純(chún)化(huà)法(fǎ)

• 工藝(yì)特(tè)點：通過溶解(jiě)，調(tiáo)節pH，降(jiàng)溫結晶(jīng)，過濾洗滌(dí)等步(bù)驟(zhòu)（如重(zhòng)復兩(liǎng)次結晶），可得到(dào)純(chún)度>99%的NANA標準物(wù)質(zhì)。

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