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首頁(yè) > 新聞資訊(xùn) > 地塞(sāi)米(mǐ)鬆-過(guò)氧化物(wù)酶標記物(wù)的合成(chéng)方法(fǎ)有哪些(xiē)

地塞(sāi)米鬆-過(guò)氧(yǎng)化物酶(méi)標(biāo)記(jì)物的合(hé)成方法(fǎ)有(yǒu)哪些(xiē)

2025-03-14 [231]

地塞米鬆(sōng)-過氧(yǎng)化物酶標記(jì)物的(dí)合(hé)成方法(fǎ)主要有以(yǐ)下幾(jī)種:

戊二(èr)醛(quán)法(fǎ)

  • 原理:戊二(èr)醛(quán)是一種雙功能(néng)交(jiāo)聯劑(jì),能與(yǔ)地(dì)塞(sāi)米鬆和(hé)過(guò)氧化(huà)物酶(méi)上的氨(ān)基等活(huó)性(xìng)基團反應(yīng),形(xíng)成穩定(dìng)的共(gòng)價鍵,從而(ér)將兩者連接(jiē)起來。

  • 步(bù)驟:將地塞(sāi)米鬆(sōng)和過氧化(huà)物酶溶解在合適的(dí)緩衝(chōng)液(yè)中,調(tiáo)節pH值(zhí)至(zhì)適宜(yí)範圍,一般(bān)為(wéi)7.0-8.0。然後緩慢加(jiā)入(rù)戊(wù)二醛(quán)溶(róng)液(yè),使(shǐ)其(qí)終濃度(dù)達到(dào)一定比例,通常為0.1%-0.5%。在室(shì)溫(wēn)或特(tè)定(dìng)溫(wēn)度下(xià)攪拌(bàn)反(fǎn)應(yīng)一段時間,一般為(wéi)1-2小(xiǎo)時。反應(yīng)結束(shù)後,通(tōng)過(guò)透析,凝膠過(guò)濾等(děng)方法去除未反應的(dí)戊(wù)二(èr)醛和(hé)其他(tā)小(xiǎo)分子雜(zá)質,得到地塞米鬆(sōng)-過(guò)氧(yǎng)化物酶(méi)標(biāo)記(jì)物(wù)。

碳(tàn)二(èr)亞胺(àn)法(fǎ)

  • 原(yuán)理(lǐ):碳(tàn)二亞胺類(lèi)試(shì)劑(jì)可(kě)活化(huà)地塞米鬆分子(zǐ)上(shàng)的羧基,使其與過氧化物酶分子(zǐ)上的(dí)氨基發(fā)生縮合反應,形成酰(xiān)胺鍵,進(jìn)而實現兩者的(dí)偶(ǒu)聯(lián)。

  • 步(bù)驟:將地塞(sāi)米(mǐ)鬆和(hé)過氧化(huà)物酶分(fēn)別(bié)溶(róng)解(jiě)在(zài)相(xiāng)應(yīng)的緩(huǎn)衝(chōng)液(yè)中,加入(rù)碳二亞胺類(lèi)試(shì)劑,如(rú)EDC(1-乙基(jī)-3-(3-二(èr)甲基(jī)氨基(jī)丙基(jī))碳(tàn)二(èr)亞胺(àn)鹽酸鹽(yán)),使(shǐ)其終濃度為(wéi)0.1-0.5mol/L。調節pH值至4.0-6.0,在(zài)室溫下(xià)攪(jiǎo)拌反應(yīng)數小時。反(fǎn)應(yīng)完(wán)成後(hòu),通過(guò)透(tòu)析(xī),離(lí)心等方法進行純化,得(dé)到標(biāo)記物。

混合(hé)酸(suān)酐法

  • 原(yuán)理(lǐ):先將(jiāng)地塞米(mǐ)鬆的(dí)羧基(jī)與氯(lǜ)甲酸異丁(dīng)酯等試(shì)劑反應生成混(hùn)合酸(suān)酐(gān),再(zài)與過(guò)氧(yǎng)化物酶(méi)的氨基(jī)反應,形(xíng)成共價連(lián)接。

  • 步(bù)驟:將(jiāng)地塞米鬆(sōng)溶解在有(yǒu)機溶劑(jì)中(zhōng),加入氯甲酸異(yì)丁酯(zhǐ)和(hé)三乙胺,在低溫下反應生成混合酸酐。然後將過氧(yǎng)化物酶溶液(yè)加(jiā)入其(qí)中(zhōng),在(zài)室溫(wēn)下攪(jiǎo)拌反應(yīng)一段時間(jiān)。最後通(tōng)過透析(xī),層析(xī)等(děng)方(fāng)法分(fēn)離純化標記物。

過碘酸(suān)鈉(nà)氧(yǎng)化法(fǎ)

  • 原理:過(guò)碘(diǎn)酸鈉可(kě)將(jiāng)過(guò)氧化物(wù)酶(méi)分(fēn)子上的糖基(jī)氧化為(wéi)醛(quán)基,醛基(jī)再與地塞米鬆分子上(shàng)的氨(ān)基發(fā)生反(fǎn)應(yīng),形成(chéng)席(xí)夫鹼,從而(ér)實現標(biāo)記。

  • 步(bù)驟:將(jiāng)過氧化物(wù)酶(méi)用過碘酸(suān)鈉(nà)溶液(yè)在(zài)一定條件下(xià)進行氧(yǎng)化(huà)反(fǎn)應,生成含(hán)醛基(jī)的(dí)過氧化物酶(méi)。然(rán)後將地塞米鬆與(yǔ)氧(yǎng)化後的(dí)過(guò)氧化(huà)物酶在適(shì)宜(yí)的pH值和溫(wēn)度(dù)下反應(yīng),形成(chéng)席(xí)夫鹼。最後(hòu)用(yòng)硼氫化*等(děng)還原(yuán)劑將席夫鹼(jiǎn)還原為穩定的(dí)共價(jià)鍵,再(zài)進(jìn)行(háng)純化(huà)。

關於我(wǒ)們(mén):

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溫(wēn)馨提(tí)示:供(gōng)應產品(pǐn)僅用(yòng)於科研,不能(néng)用於人體(tǐ)!

相(xiāng)關產品(pǐn):

Heparin-Alkyne,肝(gān)素-炔基(jī) 

DOX-NH2,氨基(jī)修飾(shì)的阿(ā)黴(méi)素(sù)

多粘(nián)菌素(sù)-BSA,Polymyxin B sulfate-BSA

多(duō)粘菌素(sù)-OVA,Polymyxin B sulfate-OVA

BSA-7-木糖紫杉醇,BSA-XYLOTAXOL, 7-(RG)

OVA-7-木(mù)糖紫(zǐ)杉(shān)醇(chún)OVA-XYLOTAXOL, 7-(RG)

姜黃素(sù)-透明質酸,HA-Curcumin

Ce6-DBCO 

Streptavidin-thiol巰基(jī)化(huà)鏈黴親(qīn)和(hé)素

Hemin-NHS 活(huó)性(xìng)酯修飾氯高(gāo)鐵(tiě)血(xiě)紅(hóng)素(sù)

Hyaluronate-NHS,活(huó)化酯(zhǐ)修飾透明(míng)質酸