1. 標記原理

• 漢黃芩(qín)素（Wogonin）是(shì)一(yī)種黃(huáng)酮類化合物，它含有(yǒu)多個(gè)活性官(guān)能(néng)團，如羥(qiǎng)基（-OH）等。標記(jì)生物(wù)素主要(yào)是利(lì)用漢黃(huáng)芩素(sù)的活(huó)性(xìng)官能團與(yǔ)生(shēng)物素(sù)分(fēn)子(zǐ)上(shàng)合(hé)適的反應基團(tuán)（如羧基，氨基(jī)等(děng)）進(jìn)行(háng)化學反(fǎn)應，從而(ér)將(jiāng)兩者連接(jiē)起來。例(lì)如，可(kě)以(yǐ)通過(guò)形成(chéng)酯(zhǐ)鍵或酰胺鍵等(děng)方式(shì)實現標(biāo)記。

2. 標(biāo)記的化(huà)學(xué)方法

• 選擇合適(shì)的(dí)反應(yīng)類型

• 形成酯(zhǐ)鍵：如果利(lì)用漢黃芩素(sù)的羥(qiǎng)基與生(shēng)物素的羧基(jī)反(fǎn)應形(xíng)成酯鍵，需要(yào)使用合(hé)適(shì)的縮合劑(jì)。常用的(dí)縮(suō)合(hé)劑有二(èr)環己基碳二亞胺（DCC）和 4 - 二甲(jiǎ)氨基(jī)吡啶(dìng)（DMAP）。首(shǒu)先將(jiāng)漢黃(huáng)芩素和生物(wù)素(sù)溶解在適當的有(yǒu)機溶(róng)劑(jì)中，如無水二(èr)氯甲(jiǎ)烷(wán)或(huò) N,N - 二甲(jiǎ)基甲(jiǎ)酰(xiān)胺（DMF）。漢黃(huáng)芩素(sù)的(dí)濃度可(kě)以為(wéi) 0.1 - 1mmol/L，生物(wù)素(sù)的濃(nóng)度根據(jù)反應摩爾(ěr)比(bǐ)來(lái)確(què)定(dìng)，通(tōng)常漢黃芩素與生物素的摩爾比(bǐ)為(wéi) 1:1 - 1:2。

• 反應(yīng)過程：加(jiā)入(rù)適(shì)量的 DCC（一般為(wéi)漢黃(huáng)芩(qín)素摩(mó)爾數(shù)的(dí) 1 - 1.2 倍(bèi)）和少(shǎo)量(liáng)的(dí) DMAP（一般(bān)為漢(hàn)黃芩(qín)素摩(mó)爾數的 0.1 - 0.2 倍(bèi)）作(zuò)為(wéi)催化(huà)劑。反應(yīng)在(zài)室(shì)溫(wēn)或低(dī)溫（如(rú) 0 - 4℃）下攪拌進行，反應時間(jiān)可(kě)能需(xū)要(yào) 12 - 48 小(xiǎo)時(shí)。通過薄(báo)層色譜（TLC）監(jiān)測(cè)反應進程，觀(guān)察原(yuán)料斑點(diǎn)的(dí)消失(shī)和(hé)新產物斑(bān)點的出(chū)現。

形成酰胺鍵(jiàn)：如(rú)果(guǒ)利用(yòng)漢黃(huáng)芩素(sù)的氨(ān)基(jī)（如果有(yǒu)）與生物素的羧(suō)基反(fǎn)應形(xíng)成(chéng)酰胺鍵，可采用(yòng)類(lèi)似(sì)的策略。不過，也可(kě)以使用 1 - 乙基 - 3 -（3 - 二甲氨(ān)基丙(bǐng)基(jī)）碳化二亞胺(àn)（EDC）作為(wéi)縮合(hé)劑。反(fǎn)應條(tiáo)件(jiàn)與(yǔ)上(shàng)述酯(zhǐ)鍵形成反(fǎn)應(yīng)類似(sì)，但緩衝液體係可(kě)能更合適，例如(rú)可以使用 MES 緩衝(chōng)液(yè)（pH 5 - 6）來(lái)控(kòng)製反(fǎn)應的 pH 值(zhí)。

產(chǎn)物純(chún)化：反應(yīng)結(jié)束後，需要對(duì)產(chǎn)物進行(háng)純(chún)化(huà)。對於(yú)通過(guò)酯鍵(jiàn)或酰胺鍵(jiàn)連接的(dí)漢黃(huáng)芩素(sù) - 生物素標記(jì)物(wù)，可以采用柱(zhù)色譜法進行純化。例(lì)如(rú)，使(shǐ)用(yòng)矽(guī)膠(jiāo)柱色譜，以(yǐ)適(shì)當的洗脫劑(jì)（如石(shí)油(yóu)醚(mí) - 乙酸(suān)乙(yǐ)酯(zhǐ)混合(hé)溶劑(jì)）進(jìn)行梯度(dù)洗脫，根(gēn)據產物和(hé)原(yuán)料在極(jí)性等(děng)方麵的差(chà)異分離出(chū)標記產(chǎn)物。

3.標記後的應用(yòng)

• 在細(xì)胞(bāo)生(shēng)物學研(yán)究(jiū)中(zhōng)，漢黃(huáng)芩(qín)素標(biāo)記生物素後，可(kě)以(yǐ)利用(yòng)生物(wù)素(sù)與(yǔ)親(qīn)和素的(dí)特異性結合特(tè)性(xìng)，通過(guò)親和(hé)素連(lián)接熒光標記物或酶(méi)標記物(wù)，用於研究漢(hàn)黃(huáng)芩(qín)素(sù)在細(xì)胞內(nèi)的(dí)定位(wèi)和(hé)代(dài)謝途(tú)徑。例如(rú)，在細(xì)胞(bāo)成像實驗中，通過熒光標記的親和(hé)素(sù)與(yǔ)標(biāo)記(jì)有生物(wù)素的(dí)漢黃(huáng)芩素結(jié)合，用熒光(guāng)顯微鏡觀察漢(hàn)黃芩素在(zài)細(xì)胞內(nèi)的分(fēn)布(bù)情(qíng)況(kuàng)，從而了解(jiě)其(qí)在細胞攝取，轉(zhuǎn)運(yùn)和作(zuò)用(yòng)靶(bǎ)點等方(fāng)麵的(dí)信息。在(zài)藥物研發(fā)領(lǐng)域，這種標(biāo)記(jì)有助於(yú)篩(shāi)選和評估(gū)漢(hàn)黃芩素的(dí)藥物活性和(hé)作(zuò)用機(jī)製(zhì)，為(wéi)開(kāi)發(fā)基(jī)於漢(hàn)黃(huáng)芩(qín)素(sù)的新(xīn)型藥(yào)物(wù)提(tí)供實驗依據。

關(guān)於我們:

陝西星(xīng)貝(bèi)愛科(kē)生物(wù)科(kē)技(jì)經(jīng)營的產(chǎn)品(pǐn)種(zhǒng)類包括(kuò)有：合(hé)成(chéng)磷脂(zhī)，高(gāo)分子聚(jù)乙(yǐ)二(èr)醇(chún)衍生(shēng)物，嵌段共(gòng)聚物，磁性納米顆(kē)粒，納(nà)米(mǐ)金(jīn)及納米金棒(bàng)，近(jìn)紅(hóng)外熒光(guāng)染料(liào)，活性熒(yíng)光染料，熒光標(biāo)記(jì)物，蛋白交聯劑，小分子PEG衍生(shēng)物(wù)，點擊(jī)化(huà)學(xué)產品，樹(shù)枝(zhī)狀聚(jù)合物，環糊(hū)精(jīng)衍(yǎn)生物，大(dà)環配(pèi)體類，熒(yíng)光(guāng)量子(zǐ)點，透明質酸衍(yǎn)生物，石墨(mò)烯或氧化石墨(mò)烯(xī)，碳(tàn)納米管，富(fù)勒烯(xī)，二(èr)氧(yǎng)化(huà)矽(guī)及(jí)介(jiè)孔(kǒng)二氧化矽，聚(jù)合(hé)物(wù)微球(qiú)，近紅(hóng)外(wài)熒(yíng)光(guāng)染料(liào)，聚(jù)苯乙烯(xī)微(wēi)球，上轉(zhuǎn)換納(nà)米發(fā)光(guāng)顆粒(lì)，MRI核(hé)磁造(zào)影產品(pǐn)，熒(yíng)光蛋(dàn)白(bái)及熒(yíng)光探針等等(děng)。

溫馨提(tí)示：供應產品僅(jǐn)用於科(kē)研，不(bù)能用(yòng)於人體！

相(xiāng)關產品：

BSA-DXMS,牛血清白蛋(dàn)白修飾地塞(sāi)米鬆

鏈(liàn)黴親(qīn)和素-巰基(jī)，Streptavidin-SH

DBCO-BSA

氨(ān)基修(xiū)飾海(hǎi)藻酸(suān)鈉,NH2-Sodium alginate

Mannose-NHS,甘露糖修(xiū)飾(shì)活(huó)化酯

Ad-NHS，活化(huà)酯修飾金剛烷(wán)

甲硝唑(zuò)-羧基，Metronidazole-COOH

甘露(lòu)糖(táng)-MAL,Mannose-Mal

BSA-MAL,牛血清白蛋白修飾馬來酰亞(yà)胺(àn)