詳細介(jiè)紹一(yī)下(xià) FITC-海藻(zǎo)糖(táng)的(dí)熒光標記原理
2024-10-26
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FITC-海藻糖|FITC-Trehalose
FITC - 海(hǎi)藻糖(táng)的(dí)熒光(guāng)標記(jì)原理主要基於熒光(guāng)素異(yì)硫氰酸(suān)酯(FITC)與海(hǎi)藻糖的(dí)化學(xué)反應以及(jí) FITC 的(dí)熒光(guāng)特(tè)性,具(jù)體如下(xià):
1.FITC 的(dí)結構與(yǔ)特性:
FITC 是(shì)一(yī)種有機(jī)熒光染料(liào),其(qí)分(fēn)子結構中含(hán)有異(yì)硫(liú)氰酸(suān)基(jī)團(tuán)(-N=C=S),這(zhè)個基(jī)團具有較高的化學反應活性(xìng)。
在(zài)特定(dìng)的條件(jiàn)下,FITC 能(néng)夠與含有氨基(-NH₂)等活性基團(tuán)的分子發(fā)生(shēng)共(gòng)價結合(hé)。並且(qiě) FITC 在受到特(tè)定波長的(dí)光激發後(hòu),能夠(gòu)吸收能量(liáng)並(bìng)發射出特定波長(cháng)的(dí)熒(yíng)光,這是其(qí)能夠作為(wéi)熒(yíng)光(guāng)標(biāo)記(jì)物的(dí)重要基礎(chǔ)。
2.海(hǎi)藻(zǎo)糖的結(jié)構與可(kě)修飾位點:
海(hǎi)藻糖是(shì)一種(zhǒng)由(yóu)兩(liǎng)個葡(pú)萄糖(táng)分子以 1,1 - 糖苷鍵構(gòu)成(chéng)的非(fēi)還原性糖(táng)。其(qí)分(fēn)子結(jié)構相對穩定(dìng),但(dàn)可(kě)以通(tōng)過(guò)化學方法對其(qí)進(jìn)行修飾(shì)。
通常需要先對海(hǎi)藻糖進行化(huà)學處(chǔ)理(lǐ),在其分(fēn)子(zǐ)上引入(rù)羧基(-COOH)等(děng)活性基(jī)團(tuán),使其(qí)能(néng)夠(gòu)與 FITC 發(fā)生(shēng)反(fǎn)應。比(bǐ)如可(kě)以使用丁(dīng)二酸酐等試劑(jì)與(yǔ)海藻糖反(fǎn)應(yīng),將(jiāng)海(hǎi)藻糖(táng)上的羥基(-OH)轉化(huà)為羧(suō)基(jī)。
3.標(biāo)記(jì)反應過程:
當(dāng)經(jīng)過(guò)處理後(hòu)的帶(dài)有羧基的海藻糖與(yǔ) FITC 混合(hé)時,FITC 的異(yì)硫(liú)氰酸基(jī)團會與海(hǎi)藻(zǎo)糖分(fēn)子上(shàng)的(dí)羧基發(fā)生(shēng)親(qīn)核(hé)加成反(fǎn)應,形(xíng)成穩定(dìng)的共(gòng)價鍵,從而將 FITC 連(lián)接(jiē)到(dào)海藻(zǎo)糖分子(zǐ)上(shàng)。
經過反(fǎn)應後,得(dé)到(dào)的(dí) FITC - 海藻糖(táng)復(fù)合(hé)物(wù)既保留(liú)了(liǎo)海(hǎi)藻糖的(dí)基(jī)本(běn)結構和性質,又具(jù)有了(liǎo) FITC 的熒光特性。當用(yòng)特定(dìng)波(bō)長(cháng)(如 493nm 左(zuǒ)右)的光(guāng)照(zhào)射(shè) FITC - 海藻糖時,它會(huì)吸收(shōu)光(guāng)子(zǐ)能量,電子(zǐ)從基(jī)態(tài)躍遷(qiān)到激發態,隨(suí)後電子(zǐ)從激發(fā)態(tài)回到(dào)基態時會釋放出能量(liáng),發(fā)出波長約(yuē)為 520nm 的(dí)綠(lǜ)色熒(yíng)光(guāng)。
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相(xiāng)關產品:
FITC-甲(jiǎ)硫(liú)氨(ān)酸,FITC-Methionine
Cy5-甜菊柑(gān),CY5-Stevioside
FITC-羧甲基(jī)纖(xiān)維(wéi)素(sù),FITC-CMC
DBCO-β環(huán)糊精,DBCO-β Cyclodextrin,DBCO-CD
FITC-Collagen膠原(yuán)蛋(dàn)白
CY7-膽汁(zhī)酸(suān),CY7-Cholicacid
CY7-L-岩(yán)藻糖(táng),CY7-L-(-)-Fucose
Fitc-天(tiān)麻(má)素,FITC-Gastrodin
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