磺胺嘧啶-牛血清白(bái)蛋白偶聯物|Sulfadiazine BSA Conjugate（SD-BSA,4-Amino-N-(2-pyrimidinyl)benzenesulfonamide，N1-(Pyrimidin-2-yl)sulfanilamide）

磺胺嘧(mì)啶 - 牛(niú)血(xiě)清白(bái)蛋白(bái)偶(ǒu)聯(lián)物的(dí)合成(chéng)方(fāng)法主要有以(yǐ)下幾種：

1.重(zhòng)氮(dàn)化法(fǎ)：

原(yuán)理(lǐ)：磺胺嘧(mì)啶分(fēn)子結構中的(dí)芳(fāng)香胺(àn)基在酸(suān)性(xìng)條件(jiàn)下與(yǔ)亞(yà)硝酸鈉反(fǎn)應(yīng)生成重氮(dàn)鹽(yán)，重(zhòng)氮鹽(yán)再(zài)與(yǔ)牛血(xiě)清(qīng)白蛋(dàn)白上(shàng)的親核基團（如酪氨酸殘基的酚(fēn)羥基(jī)，組(zǔ)氨(ān)酸殘(cán)基的咪唑(zuò)基等(děng)）發生偶聯反(fǎn)應(yīng)，從而將(jiāng)磺(huáng)胺(àn)嘧啶與牛血清白(bái)蛋白連接起來(lái)
。

步(bù)驟：首先(xiān)將磺胺嘧(mì)啶溶解在酸性(xìng)溶(róng)液中，加入(rù)亞硝酸(suān)鈉進(jìn)行(háng)重氮化(huà)反(fǎn)應，生(shēng)成(chéng)重氮鹽(yán)溶液(yè)；然後將牛(niú)血清(qīng)白蛋白(bái)溶解(jiě)在適(shì)當(dāng)的緩衝液中(zhōng)，將(jiāng)重氮鹽(yán)溶(róng)液緩(huǎn)慢滴(dī)加到牛血(xiě)清白蛋(dàn)白溶(róng)液中(zhōng)，在(zài)一定的(dí)溫(wēn)度和 pH 值條件(jiàn)下(xià)反(fǎn)應(yīng)一段時間；最(zuì)後通過(guò)透(tòu)析，離(lí)心等方(fāng)法對反應(yīng)產(chǎn)物(wù)進(jìn)行(háng)純(chún)化(huà)，得到磺(huáng)胺嘧(mì)啶(dìng) - 牛(niú)血(xiě)清(qīng)白蛋(dàn)白偶(ǒu)聯(lián)物
。

2.戊(wù)二醛法：

原理：戊(wù)二醛是一種雙功(gōng)能(néng)交聯(lián)劑，分(fēn)子(zǐ)中含(hán)有(yǒu)兩個(gè)醛(quán)基，可以(yǐ)分別(bié)與磺(huáng)胺(àn)嘧啶(dìng)和牛血清白蛋(dàn)白上的(dí)氨基(jī)發生反應(yīng)，形(xíng)成席夫鹼，從而將(jiāng)兩者(zhě)偶(ǒu)聯在(zài)一(yī)起
。

步驟：將磺(huáng)胺嘧啶(dìng)和牛血清(qīng)白蛋(dàn)白(bái)分別溶解(jiě)在(zài)適當的(dí)緩衝液(yè)中(zhōng)，將(jiāng)戊(wù)二(èr)醛溶液(yè)加(jiā)入到(dào)磺胺(àn)嘧啶(dìng)溶液中，使(shǐ)其(qí)與磺胺(àn)嘧(mì)啶發生(shēng)反(fǎn)應，生成(chéng)帶有(yǒu)醛基(jī)的(dí)磺胺嘧啶中間(jiān)產物(wù)；然後將此(cǐ)中間產(chǎn)物緩慢滴加(jiā)到(dào)牛(niú)血清(qīng)白蛋白(bái)溶液(yè)中(zhōng)，在一定的(dí)溫(wēn)度和 pH 值條件下(xià)反(fǎn)應一段時間；最後(hòu)對反應(yīng)產物(wù)進(jìn)行純化，得到(dào)磺胺嘧(mì)啶 - 牛血清(qīng)白(bái)蛋(dàn)白(bái)偶(ǒu)聯物
。

3.混合酸(suān)酐法(fǎ)：

原理：先將(jiāng)磺胺嘧啶(dìng)與酸(suān)酐反應生成(chéng)混(hùn)合(hé)酸酐(gān)，混合(hé)酸(suān)酐(gān)再(zài)與牛(niú)血(xiě)清白蛋白上(shàng)的氨基發(fā)生反應，形成酰胺(àn)鍵，從而(ér)實現偶聯
。

步(bù)驟(zhòu)：將磺(huáng)胺嘧(mì)啶溶(róng)解在有(yǒu)機溶劑中(zhōng)，加(jiā)入酸酐(gān)和(hé)催(cuī)化劑，在一(yī)定的溫(wēn)度下反應(yīng)一(yī)段(duàn)時(shí)間(jiān)，生成混合(hé)酸酐；將牛(niú)血(xiě)清(qīng)白蛋(dàn)白溶(róng)解在(zài)適(shì)當的緩衝液中，將(jiāng)混合酸(suān)酐(gān)溶液緩(huǎn)慢(màn)滴加(jiā)到牛血(xiě)清(qīng)白蛋(dàn)白溶(róng)液(yè)中(zhōng)，在(zài)一定(dìng)的(dí)溫(wēn)度和 pH 值(zhí)條件下反應(yīng)一段時間；最後對(duì)反(fǎn)應產(chǎn)物(wù)進(jìn)行純化(huà)，得(dé)到(dào)磺(huáng)胺嘧啶 - 牛血清(qīng)白蛋白偶聯(lián)物
。

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