玉米赤黴烯酮(tóng)-雞卵(luǎn)清(qīng)白蛋白偶聯(lián)物(wù)的合成方(fāng)法(fǎ)有哪(nǎ)些?
2024-10-17
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玉(yù)米赤黴(méi)烯(xī)酮-雞(jī)卵(luǎn)清白(bái)蛋白(bái)偶(ǒu)聯(lián)物|Zearalenone-Ovalbumin Conjugate(ZEN-OVA Conjugate)
玉米赤黴(méi)烯酮(tóng) - 雞(jī)卵清白蛋白偶聯物的(dí)合成方(fāng)法主(zhǔ)要(yào)有(yǒu)以下幾(jī)種:
1.碳二亞胺法(fǎ):
原理(lǐ):利用碳二亞胺類化合物(wù)(如 EDC,即(jí) 1 - 乙基(jī) -(3 - 二甲(jiǎ)基氨(ān)基丙(bǐng)基) 碳(tàn)二亞胺鹽酸鹽(yán))作為(wéi)偶(ǒu)聯劑。碳二亞(yà)胺(àn)能夠活(huó)化玉米赤(chì)黴烯酮分(fēn)子(zǐ)中的羧基(jī),使其與雞卵清(qīng)白(bái)蛋白上的氨基(jī)發生縮(suō)合反應(yīng),從(cóng)而形成酰(xiān)胺(àn)鍵,將(jiāng)兩者(zhě)偶聯在一(yī)起。
步驟:首先(xiān)將玉(yù)米(mǐ)赤黴烯酮(tóng)溶(róng)解在(zài)適當的溶(róng)劑(如(rú)二(èr)甲基甲(jiǎ)酰胺等)中(zhōng),並加(jiā)入一定(dìng)量的(dí)碳二亞(yà)胺(àn)偶(ǒu)聯劑,在(zài)一定的(dí)溫度(dù)(如(rú)室溫或稍高(gāo)溫(wēn)度)下(xià)攪拌(bàn)反(fǎn)應(yīng)一段時間(jiān),使玉米赤黴(méi)烯酮的羧(suō)基(jī)被活(huó)化。然(rán)後將(jiāng)活(huó)化(huà)後(hòu)的玉米赤黴烯(xī)酮溶(róng)液緩慢(màn)滴加到含(hán)有(yǒu)雞(jī)卵清白(bái)蛋白的(dí)緩(huǎn)衝溶液中(zhōng),繼(jì)續攪(jiǎo)拌反(fǎn)應數(shù)小時(shí)。反(fǎn)應結束(shù)後(hòu),通過透析或超濾(lǜ)等(děng)方法去(qù)除未反應的(dí)物質和雜質(zhì),得到玉米(mǐ)赤黴烯(xī)酮(tóng) - 雞(jī)卵(luǎn)清(qīng)白蛋(dàn)白偶聯物。
2.戊(wù)二醛(quán)法:
原(yuán)理(lǐ):戊二(èr)醛是(shì)一種雙功(gōng)能(néng)交聯(lián)劑(jì),它(tā)可以(yǐ)與玉米赤(chì)黴(méi)烯酮和雞(jī)卵(luǎn)清(qīng)白蛋(dàn)白上(shàng)的氨(ān)基分(fēn)別(bié)反應(yīng),形成(chéng)席夫鹼結構,從(cóng)而將兩(liǎng)者(zhě)連(lián)接(jiē)起(qǐ)來(lái)。
步驟:把雞(jī)卵清白蛋(dàn)白溶解(jiě)在合適(shì)的(dí)緩(huǎn)衝(chōng)溶(róng)液中,將玉米赤(chì)黴烯(xī)酮(tóng)溶解在有(yǒu)機溶劑(如乙醇(chún)等)中,然後將(jiāng)兩者混(hùn)合(hé),並(bìng)加(jiā)入(rù)適量的戊二醛溶(róng)液(yè)。在一定(dìng)的溫度(dù)和 pH 條(tiáo)件下(如(rú) pH 7.4 左(zuǒ)右,37℃)反應(yīng)數(shù)小(xiǎo)時(shí)至(zhì)過(guò)夜。反(fǎn)應完成後(hòu),同樣(yàng)通(tōng)過(guò)透析或(huò)超(chāo)濾(lǜ)等(děng)方法純化產(chǎn)物,得到玉(yù)米(mǐ)赤(chì)黴烯酮(tóng) - 雞(jī)卵(luǎn)清白(bái)蛋白偶(ǒu)聯物(wù)。
3.混合酸(suān)酐(gān)法(fǎ):
原理(lǐ):先(xiān)將玉米(mǐ)赤黴(méi)烯酮(tóng)與酸(suān)酐(gān)反應生(shēng)成混(hùn)合酸(suān)酐,混合(hé)酸酐具(jù)有較高(gāo)的反應(yīng)活(huó)性(xìng),能(néng)夠與(yǔ)雞卵清白蛋白上的氨基(jī)發生(shēng)反(fǎn)應(yīng),實(shí)現偶聯。
步驟:將玉米赤(chì)黴(méi)烯酮溶解(jiě)在有機(jī)溶劑中(zhōng),加入(rù)三乙胺(àn)等鹼催(cuī)化劑(jì)和酸酐(gān)(如氯(lǜ)甲酸(suān)異(yì)丁酯(zhǐ)等),在低溫(如(rú) 0-4℃)下(xià)反應一段時(shí)間(jiān),生成玉米赤黴烯(xī)酮的(dí)混(hùn)合酸酐。隨後(hòu)將生成(chéng)的(dí)混合酸(suān)酐溶(róng)液緩慢滴(dī)加到(dào)雞(jī)卵清白(bái)蛋白的緩(huǎn)衝(chōng)溶(róng)液(yè)中,在低溫下繼(jì)續反應(yīng)數小時(shí)。最後(hòu)經過(guò)純化(huà)處理(lǐ)得(dé)到(dào)偶(ǒu)聯(lián)物。
關於(yú)我們:
陝西(xī)星(xīng)貝愛科生物(wù)科技經(jīng)營的(dí)產品(pǐn)種(zhǒng)類(lèi)包(bāo)括(kuò)有:合成(chéng)磷(lín)脂,高分(fēn)子(zǐ)聚乙二醇(chún)衍生物,嵌段共聚物,磁性納米(mǐ)顆粒(lì),納米金(jīn)及(jí)納(nà)米金(jīn)棒,近紅外(wài)熒(yíng)光染(rǎn)料(liào),活(huó)性熒(yíng)光(guāng)染(rǎn)料,熒光標(biāo)記物,蛋白交(jiāo)聯(lián)劑,小分子PEG衍生物(wù),點擊(jī)化學產品,樹(shù)枝狀(zhuàng)聚(jù)合物(wù),環(huán)糊(hū)精(jīng)衍生(shēng)物,大環(huán)配體類(lèi),熒光(guāng)量(liáng)子點(diǎn),透明(míng)質(zhì)酸(suān)衍生物,石(shí)墨(mò)烯或氧(yǎng)化石(shí)墨烯,碳(tàn)納米(mǐ)管,富勒烯(xī),二(èr)氧化(huà)矽及介(jiè)孔二(èr)氧(yǎng)化矽,聚合物(wù)微球,近紅外熒(yíng)光(guāng)染料,聚苯乙(yǐ)烯微球,上轉換納米發光(guāng)顆粒(lì),MRI核(hé)磁造影(yǐng)產品,熒光蛋白(bái)及熒光(guāng)探針(zhēn)等等(děng)。
溫(wēn)馨提(tí)示:供(gōng)應(yīng)產(chǎn)品僅(jǐn)用(yòng)於(yú)科研(yán),不能用於人(rén)體!
相(xiāng)關產(chǎn)品:
綠原酸-巰基,Chlorogenic acid-SH
Protein A-Thiol,HS巰(qiú)基化重組(zǔ)蛋白(bái)A
DSPE-精氨酸
阿倫磷(lín)酸(suān)-硬(yìng)脂酸(suān),Alendronate sodium-Stearic acid
甘(gān)露糖-金剛(gāng)烷(wán),MANNOSE-Ad
吲哚美辛(xīn)-過氧化(huà)物酶標記(jì)物,Indometacin-HRP Conjugate
吲哚(duǒ)美(měi)辛(xīn)-雞(jī)卵清白蛋(dàn)白(bái)偶(ǒu)聯物,Indometacin-OVA Conjugate
吲(yǐn)哚(duǒ)美(měi)辛-牛血(xiě)清(qīng)白(bái)蛋白(bái)偶聯物,Indometacin-BSA Conjugate

