大(dà)黃酸(suān)-牛血清白(bái)蛋白(bái)偶(ǒu)聯物(wù)|Rhein-BSA Conjugate(RH-BSA)

可(kě)以通過以(yǐ)下(xià)方法確定大黃酸(suān) - 牛血清白蛋(dàn)白(bái)偶聯(lián)物(wù)的最佳偶(ǒu)聯比：

一(yī)，紫外分(fēn)光光度法

分(fēn)別(bié)測定大(dà)黃酸，牛(niú)血(xiě)清白蛋(dàn)白以及偶(ǒu)聯物(wù)在(zài)特定(dìng)波(bō)長(cháng)下的(dí)吸(xī)光(guāng)度。

大黃酸在一定(dìng)波(bō)長下有特征(zhēng)吸收(shōu)峰(fēng)。

牛血清白(bái)蛋白在(zài)不同波(bō)長下也(yě)有(yǒu)其特定的吸收特(tè)征。

根據吸(xī)光(guāng)度的(dí)加和(hé)性(xìng)原理，計(jì)算偶聯比。

假設(shè)大(dà)黃(huáng)酸在波(bō)長 A 處的吸光度為(wéi) A1，牛血清白(bái)蛋(dàn)白(bái)在該波(bō)長處吸(xī)光度可忽略(lüè)不(bù)計(jì)。偶(ǒu)聯物在(zài)波長(cháng) A 處(chǔ)吸光度(dù)為(wéi) A2。

根(gēn)據朗伯 - 比(bǐ)爾定律(lǜ)，吸光度(dù)與濃度(dù)成(chéng)正(zhèng)比。設大黃酸的摩(mó)爾吸光係數(shù)為 ε1，牛血清白蛋(dàn)白(bái)的(dí)摩(mó)爾(ěr)濃(nóng)度為(wéi) C2（已知其分子量(liáng)可換算出(chū)物質的量濃度），大黃(huáng)酸(suān)的(dí)物質(zhì)的量(liáng)濃(nóng)度為 C1。

則有(yǒu) A1 = ε1×C1，A2 = ε1×(C1×n)，其(qí)中 n 為(wéi)偶(ǒu)聯比，即一個牛血(xiě)清(qīng)白蛋白分子上(shàng)結合的大(dà)黃酸分(fēn)子數。

通(tōng)過(guò)計(jì)算(suàn)可得出(chū)偶(ǒu)聯(lián)比 n = A2/A1。

二，元(yuán)素(sù)分析法

測定偶聯(lián)物(wù)中的(dí)氮(dàn)元素含(hán)量。

牛(niú)血(xiě)清白(bái)蛋白含有一定(dìng)量的氮元素(sù)，通(tōng)過(guò)元素(sù)分(fēn)析(xī)可以(yǐ)準(zhǔn)確測定(dìng)其含量(liáng)。

大黃酸(suān)中(zhōng)氮元(yuán)素(sù)含(hán)量(liáng)相對較(jiào)少，可(kě)以(yǐ)忽略不計(jì)。

計算偶聯比(bǐ)。

已知牛(niú)血清(qīng)白蛋白(bái)的分子量和氮元(yuán)素的(dí)質(zhì)量(liáng)分數(shù)，根據(jù)測(cè)定的(dí)氮元(yuán)素含(hán)量(liáng)可(kě)以計算(suàn)出牛(niú)血清白蛋白的物質(zhì)的(dí)量。

假設偶聯物中(zhōng)牛血(xiě)清白蛋白(bái)的物質(zhì)的(dí)量為 n1，通過(guò)測(cè)定偶聯(lián)物(wù)的總(zǒng)質量和已知的(dí)牛(niú)血(xiě)清(qīng)白蛋(dàn)白(bái)，大(dà)黃酸的分子量，可以(yǐ)估(gū)算(suàn)出大黃酸(suān)的(dí)物質的量(liáng) n2。

偶(ǒu)聯(lián)比(bǐ)即(jí)為 n2/n1。

三，凝膠過濾(lǜ)色譜法(fǎ)結合紫(zǐ)外(wài)檢測(cè)

將不同(tóng)偶(ǒu)聯比的(dí)大黃酸 - 牛血清白蛋(dàn)白(bái)偶聯物進行凝膠(jiāo)過濾色(sè)譜分離。

利用凝(níng)膠過(guò)濾(lǜ)色譜可以(yǐ)根據分(fēn)子(zǐ)大小分(fēn)離不(bù)同的物質。

偶聯物(wù)的(dí)分(fēn)子量會隨著偶(ǒu)聯比的增(zēng)加(jiā)而(ér)增大。

同時(shí)使用(yòng)紫外(wài)檢測(cè)器(qì)監測流(liú)出液在(zài)大黃(huáng)酸和牛(niú)血清白蛋(dàn)白(bái)特征波長下(xià)的(dí)吸(xī)光(guāng)度。

通過(guò)吸光(guāng)度的(dí)變(biàn)化(huà)可以判(pàn)斷(duàn)不同(tóng)偶聯比的(dí)偶聯物(wù)在色(sè)譜柱上的洗脫行(háng)為。

選擇(zé)分離效果好，吸(xī)光度比值穩定的(dí)偶(ǒu)聯(lián)物(wù)對(duì)應的偶聯(lián)比作為(wéi)最佳偶聯(lián)比。

四，生物活(huó)性測定(dìng)法

製備一係列不(bù)同(tóng)偶聯(lián)比的大(dà)黃酸 - 牛(niú)血清(qīng)白蛋白(bái)偶聯(lián)物。

用這(zhè)些(xiē)偶聯物進行(háng)生(shēng)物(wù)活(huó)性測定實驗(yàn)，例如(rú)免疫動物製備抗體，觀察(chá)抗體(tǐ)產生的效(xiào)價。

如果(guǒ)偶(ǒu)聯(lián)比(bǐ)過低，可能(néng)無(wú)法有(yǒu)效刺激動(dòng)物產(chǎn)生抗體；如果偶聯(lián)比過(guò)高(gāo)，可能會導致偶聯物(wù)的免疫原(yuán)性(xìng)發生變(biàn)化，影響(xiǎng)抗(kàng)體的(dí)產生。

選(xuǎn)擇(zé)能夠產(chǎn)生最(zuì)佳生(shēng)物(wù)活(huó)性(xìng)（如(rú)抗體(tǐ)效價最(zuì)高）的(dí)偶聯(lián)物(wù)對應的偶聯(lián)比作為最佳偶聯(lián)比(bǐ)。

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溫馨(xīn)提示：供(gōng)應產品僅用於科(kē)研，不能(néng)用(yòng)於人體！

相(xiāng)關產品(pǐn)：

維生素(sù)A-過氧化物酶標記物Vitamin A-Peroxidase Conjugate(Vitamin A-HRP)

維生素A-雞卵(luǎn)清(qīng)白蛋白(bái)偶(ǒu)聯物Vitamin A-Ovalbumin Conjugate(Vitamin A-OVA Conjugate)

維(wéi)生(shēng)素A-牛(niú)血清(qīng)白(bái)蛋(dàn)白(bái)偶(ǒu)聯物(wù)Vitamin A-Bovine Serum Albumin Conjugate(Vitamin A-BSA Conjugate)

膽鈣化醇-過(guò)氧化(huà)物酶(méi)標(biāo)記物(wù)Cholecalciferol -Peroxidase Conjugate(Cholecalciferol-HRP)

膽鈣化醇(chún)-雞卵清白蛋白(bái)偶聯物(wù)Cholecalciferol-Ovalbumin Conjugate(Cholecalciferol-OVA Conjugate)

膽(dǎn)鈣化(huà)醇(chún)-牛血清白蛋白偶聯物(wù)Cholecalciferol-Bovine Serum Albumin Conjugate(Cholecalciferol-BSA Conjugate)

煙酸-過(guò)氧化物(wù)酶標記物Niacin-Peroxidase Conjugate(Niacin-HRP)

煙酸-雞(jī)卵清(qīng)白蛋白偶(ǒu)聯物Niacin-Ovalbumin Conjugate(Niacin-OVA Conjugate)

煙酸-牛(niú)血清(qīng)白(bái)蛋白偶聯(lián)物(wù)Niacin-Bovine Serum Albumin Conjugate(Niacin-BSA Conjugate)

核黃(huáng)素-過(guò)氧化物酶標(biāo)記物Riboflavin-Peroxidase Conjugate(Riboflavin-HRP)

核(hé)黃素-雞卵清(qīng)白(bái)蛋白(bái)偶(ǒu)聯物Riboflavin-Ovalbumin Conjugate(Riboflavin-OVA Conjugate)