芍藥苷-過氧化(huà)物酶標記(jì)物(wù)|Paeoniflorin-Peroxidase Conjugate(Paeoniflorin-HRP)

穿(chuān)心蓮(lián)內酯(zhǐ) - 牛血清白蛋白偶聯物在免(miǎn)疫原製備(bèi)中起(qǐ)著關(guān)鍵(jiàn)作(zuò)用(yòng)
，以下(xià)是(shì)其詳(xiáng)細的製(zhì)備過(guò)程
：

一
，準備工作

材料準備

穿(chuān)心蓮(lián)內(nèi)酯(zhǐ)
：確保其純度(dù)和(hé)質(zhì)量(liáng)
，以保(bǎo)證後(hòu)續偶(ǒu)聯反(fǎn)應的(dí)準確(què)性(xìng)和有效性。

牛(niú)血清白蛋白（BSA）
：具(jù)有(yǒu)良好的免疫(yì)原性
，可作(zuò)為(wéi)載體(tǐ)蛋(dàn)白與穿心(xīn)蓮(lián)內(nèi)酯(zhǐ)結合。

化學試(shì)劑
：如偶(ǒu)聯劑（如(rú)碳二(èr)亞(yà)胺
，戊二(èr)醛等(děng)）
，緩衝液等(děng)。

設(shè)備準備(bèi)

分析天(tiān)平
：精確稱量(liáng)各種(zhǒng)試劑。

攪(jiǎo)拌器
：用於混合反應(yīng)溶(róng)液。

離(lí)心機
：用(yòng)於分離(lí)和純(chún)化(huà)偶聯物。

透析袋或透(tòu)析設(shè)備(bèi)
：用(yòng)於(yú)去(qù)除未(wèi)反(fǎn)應(yīng)的物質和雜質。

二
，偶(ǒu)聯反應

活(huó)化穿心蓮(lián)內(nèi)酯

根據選(xuǎn)擇的(dí)偶(ǒu)聯劑不同(tóng)
，采(cǎi)用相應(yīng)的活化(huà)方法。例如
，使(shǐ)用碳(tàn)二(èr)亞胺時(shí)
，將穿心蓮內酯(zhǐ)溶(róng)解(jiě)在適當的(dí)緩衝液(yè)中
，加入(rù)碳二(èr)亞(yà)胺進行活化(huà)
，使(shǐ)其分(fēn)子上(shàng)的羧基或氨(ān)基等(děng)活性(xìng)基團暴露(lòu)出來。

偶聯(lián)反應

將活化後的(dí)穿心蓮(lián)內酯(zhǐ)溶(róng)液與(yǔ)牛血清白(bái)蛋白溶(róng)液混合
，在一定的(dí)溫度
，pH 值和攪拌條(tiáo)件(jiàn)下(xià)進行反(fǎn)應(yīng)。反應(yīng)時間(jiān)通常需要數(shù)小(xiǎo)時至數(shù)天
，以(yǐ)確保充分(fēn)偶(ǒu)聯。

在反(fǎn)應(yīng)過程(chéng)中(zhōng)
，穿(chuān)心蓮內酯(zhǐ)通過(guò)共價鍵與牛血(xiě)清白蛋白結(jié)合
，形成穿心蓮內(nèi)酯 - 牛血清(qīng)白(bái)蛋白(bái)偶(ǒu)聯物(wù)。

三(sān)
，純(chún)化偶(ǒu)聯物

透析

將反應後的溶(róng)液(yè)裝入(rù)透(tòu)析袋中(zhōng)
，放(fàng)入適當的(dí)透(tòu)析緩(huǎn)衝(chōng)液(yè)中(zhōng)進(jìn)行(háng)透析。透(tòu)析可以(yǐ)去除(chú)未(wèi)反應的穿心(xīn)蓮(lián)內酯(zhǐ)
，偶聯劑和(hé)其(qí)他小(xiǎo)分子(zǐ)雜(zá)質(zhì)。

透析過程通常需(xū)要進(jìn)行(háng)多次
，每次(cì)更換新的透(tòu)析(xī)緩(huǎn)衝液
，以確保充(chōng)分去(qù)除(chú)雜(zá)質。

層析(xī)純化(huà)

可以采用(yòng)凝(níng)膠(jiāo)過濾(lǜ)層(céng)析
，離(lí)子(zǐ)交(jiāo)換層(céng)析等方(fāng)法(fǎ)進一(yī)步純化偶聯(lián)物(wù)。這些(xiē)層析(xī)方法可以根(gēn)據偶聯物(wù)和雜質的分子(zǐ)大小
，電荷(hé)等性(xìng)質差異(yì)進(jìn)行分離(lí)。

通過層(céng)析純化
，可以(yǐ)獲得(dé)高純度(dù)的(dí)穿心蓮內酯 - 牛血清(qīng)白蛋白偶聯物。

四(sì)
，鑒定偶(ǒu)聯(lián)物(wù)

紫外(wài) - 可(kě)見光譜分(fēn)析(xī)

測(cè)定偶聯物在不同(tóng)波(bō)長(cháng)下的吸光(guāng)度(dù)
，與單獨的穿(chuān)心(xīn)蓮內酯(zhǐ)和牛(niú)血(xiě)清白(bái)蛋(dàn)白進行比較(jiào)。偶(ǒu)聯(lián)物(wù)的(dí)光譜(pǔ)特征應與兩(liǎng)者的特(tè)征(zhēng)相(xiāng)結(jié)合
，表明成功偶聯(lián)。

凝膠(jiāo)電泳分(fēn)析

進(jìn)行聚(jù)丙烯(xī)酰胺凝膠電(diàn)泳（SDS-PAGE）
，觀察偶(ǒu)聯物的(dí)分子量(liáng)和電泳(yǒng)行為(wéi)。與單獨的牛(niú)血(xiě)清白(bái)蛋(dàn)白相(xiāng)比
，偶(ǒu)聯物(wù)的分子量應增大(dà)
，表明穿心蓮(lián)內酯成功(gōng)結(jié)合到(dào)牛血清白蛋(dàn)白(bái)上。

免疫活性測(cè)定

可(kě)以(yǐ)通(tōng)過動物免疫(yì)實驗(yàn)或其他免疫(yì)學方法測定(dìng)偶聯(lián)物的(dí)免疫(yì)活性。例如
，將偶(ǒu)聯(lián)物(wù)注(zhù)射(shè)到動物(wù)體(tǐ)內(nèi)
，觀察(chá)是(shì)否(fǒu)能(néng)產(chǎn)生(shēng)針(zhēn)對穿心蓮(lián)內(nèi)酯(zhǐ)的特異性抗體。

五
，保存(cún)免(miǎn)疫原

保(bǎo)存(cún)條(tiáo)件(jiàn)

將純化和鑒定後(hòu)的穿(chuān)心蓮內酯 - 牛(niú)血清(qīng)白蛋白偶(ǒu)聯物保(bǎo)存(cún)在(zài)適當(dāng)的條件(jiàn)下(xià)
，通常(cháng)為(wéi)低溫(wēn)（如 -20℃或(huò) -80℃）
，幹(gān)燥
，避(bì)光的環境(jìng)中。

可以將(jiāng)偶(ǒu)聯(lián)物(wù)分(fēn)裝成(chéng)小份
，避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)
，以(yǐ)保持其穩(wěn)定(dìng)性和(hé)免疫(yì)活性(xìng)。

有效期

定期檢查偶聯物的(dí)免(miǎn)疫活性和穩定(dìng)性
，確(què)定其有效(xiào)期。在有(yǒu)效期(qī)內使用(yòng)偶(ǒu)聯物進(jìn)行免疫原(yuán)製(zhì)備(bèi)和(hé)其(qí)他(tā)實(shí)驗。

通過以上步驟
，可以(yǐ)成功(gōng)製備穿(chuān)心蓮內(nèi)酯 - 牛血(xiě)清白(bái)蛋(dàn)白(bái)偶(ǒu)聯物作為免(miǎn)疫(yì)原(yuán)
，用(yòng)於(yú)刺激(jī)動物免(miǎn)疫係(xì)統產生針(zhēn)對穿心蓮內酯的(dí)特異(yì)性抗(kàng)體
，為(wéi)穿(chuān)心蓮內酯的檢測
，研究(jiū)和(hé)應用(yòng)提供重要的(dí)工具。

關(guān)於我們:

陝(shǎn)西星(xīng)貝(bèi)愛科生(shēng)物(wù)科(kē)技經營的(dí)產(chǎn)品種類包括(kuò)有(yǒu)
：合成(chéng)磷脂
，高(gāo)分子(zǐ)聚乙(yǐ)二醇(chún)衍(yǎn)生物
，嵌段(duàn)共(gòng)聚(jù)物
，磁(cí)性納米顆粒(lì)
，納(nà)米(mǐ)金(jīn)及(jí)納(nà)米金棒(bàng)
，近(jìn)紅(hóng)外(wài)熒光染(rǎn)料(liào)
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溫(wēn)馨(xīn)提(tí)示
：供應產(chǎn)品(pǐn)僅(jǐn)用於(yú)科研(yán)
，不能用(yòng)於(yú)人(rén)體(tǐ)！

相(xiāng)關(guān)產(chǎn)品
：

多粘菌(jūn)素-OVA,Polymyxin B sulfate-OVA

BSA-7-木(mù)糖紫杉醇,BSA-XYLOTAXOL, 7-(RG)

OVA-7-木(mù)糖(táng)紫杉(shān)醇OVA-XYLOTAXOL, 7-(RG)

姜黃素-透明質(zhì)酸,HA-Curcumin

Ce6-DBCO 

Streptavidin-thiol巰基化(huà)鏈(liàn)黴(méi)親和素

Hemin-NHS 活性酯修(xiū)飾氯(lǜ)高鐵(tiě)血(xiě)紅(hóng)素(sù)

Hyaluronate-NHS,活(huó)化(huà)酯修飾透明質(zhì)酸

脫(tuō)氧膽酸(suān)-NHS,Deoxycholic acid-NHS

丙烯酰(xiān)氯-亮(liàng)氨酸(suān),Acryloyl chloride-L-Leucine