遠(yuǎn)誌皂苷元-過氧化(huà)物酶標(biāo)記物(wù)|Senegenin-Peroxidase Conjugate(Senegenin-HRP)

以下(xià)是(shì)一些(xiē)可以檢測(cè)遠(yuǎn)誌(zhì)皂苷元(yuán) - 過(guò)氧(yǎng)化物酶(méi)標記(jì)物活性的方法(fǎ)：

比(bǐ)色法(fǎ)

原理：過(guò)氧(yǎng)化物(wù)酶在(zài)有*存在的條件下，能(néng)使(shǐ)愈創(chuàng)木(mù)酚氧化(huà)生成(chéng)茶褐(hè)色物(wù)質，該(gāi)物質在 470nm 處有最(zuì)大(dà)吸收，通過(guò)分光(guāng)光(guāng)度(dù)計測量(liáng) 470nm 處的(dí)吸光(guāng)度(dù)變(biàn)化來測定(dìng)過氧(yǎng)化物(wù)酶(méi)活性，進(jìn)而反(fǎn)映遠(yuǎn)誌(zhì)皂苷(gān)元 - 過(guò)氧化(huà)物酶(méi)標記(jì)物的活(huó)性。

步(bù)驟：

製(zhì)備反(fǎn)應混合液：在(zài) 100mmol/L 磷酸緩衝(chōng)液(yè)（pH 6.0 或 pH 7.0）50ml 燒杯中，加入(rù)愈創木(mù)酚 28μl，於磁(cí)力(lì)攪(jiǎo)拌(bàn)器上(shàng)加(jiā)熱攪拌直至愈創(chuàng)木(mù)酚(fēn)溶解，待(dài)溶(róng)液冷卻(què)後，加(jiā)入(rù) 30% * 19μl，混(hùn)合均(jūn)匀(yún)，保存於(yú)冰(bīng)箱中(zhōng)。

樣品(pǐn)處理：稱(chēng)取(qǔ)適(shì)量含(hán)有遠(yuǎn)誌皂苷(gān)元 - 過氧化物酶標(biāo)記物的樣品(pǐn)，如(rú)組(zǔ)織樣品(pǐn) 1g，剪(jiǎn)碎(suì)後(hòu)放(fàng)入研(yán)缽(bō)中，加適量的磷酸(suān)緩衝(chōng)液(yè)研磨(mó)成(chéng)匀漿，以(yǐ) 4000r/min 離(lí)心(xīn) 10 - 15min，上清(qīng)液轉入 100ml 容量瓶中，殘渣再用 5ml 磷酸緩(huǎn)衝(chōng)液提取(qǔ)一次，上清(qīng)液並入(rù)容量瓶(píng)中(zhōng)，定(dìng)容至(zhì)刻度(dù)，貯於低溫下(xià)備(bèi)用(yòng)1810。

比(bǐ)色(sè)測定：取光(guāng)徑 1cm 比(bǐ)色杯 2 隻，於 1 隻中(zhōng)加(jiā)入反應混合液 3ml 和磷酸緩衝(chōng)液(yè) 1ml，作(zuò)為對照(zhào)；另 1 隻中(zhōng)加入反應(yīng)混合液 3ml 和上(shàng)述(shù)酶液 1ml（如酶活性(xìng)過(guò)高(gāo)可(kě)稀釋之(zhī)），立(lì)即開啟(qǐ)秒(miǎo)表記錄時間，於(yú)分(fēn)光光(guāng)度(dù)計上(shàng)測(cè)量波(bō)長 470nm 下吸(xī)光(guāng)度值(zhí)，每(měi)隔 1min 讀(dú)數(shù)一次(cì)。

結果(guǒ)計算：以(yǐ)每(měi)分(fēn)鐘吸光(guāng)度變(biàn)化值表(biǎo)示酶活性大(dà)小(xiǎo)，即以 ΔA470/（min・g（鮮重））表(biǎo)示(shì)之。也(yě)可(kě)以用每 min 內(nèi) A470 變(biàn)化 0.01 為 1 個過氧(yǎng)化物酶活(huó)性(xìng)單(dān)位（U）表示110。

電(diàn)化學(xué)測定(dìng)法(fǎ)

原(yuán)理：以(yǐ)*，對(duì)苯二(èr)酚為酶(méi)的(dí)底物，測定加入(rù)*後電流(liú)變(biàn)化(huà)斜(xié)率與(yǔ)酶活(huó)之間(jiān)的綫(xiàn)性(xìng)關係，從(cóng)而快(kuài)速，靈敏地測定總(zǒng)過氧(yǎng)化物(wù)酶(méi)的活性(xìng)。

步(bù)驟：

準(zhǔn)備(bèi)工(gōng)作(zuò)電(diàn)極(jí)，參比(bǐ)電極(jí)和(hé)對(duì)電(diàn)極(jí)，構建(jiàn)電化(huà)學檢(jiǎn)測體係。

配(pèi)製(zhì)含有*和(hé)對苯二(èr)酚的底物溶(róng)液。

將(jiāng)含有遠(yuǎn)誌皂苷(gān)元(yuán) - 過氧化物酶標記物的樣品溶液加入(rù)到(dào)檢測(cè)體(tǐ)係(xì)中。

記錄加(jiā)入*後電流隨時間的變化，通過分析(xī)電流變化斜(xié)率(shuài)與酶活性(xìng)的關係(xì)來確定標(biāo)記(jì)物的活(huó)性。

關於(yú)我們:

陝西(xī)星貝(bèi)愛科生物(wù)科(kē)技經營(yíng)的產品(pǐn)種類包括(kuò)有(yǒu)：合(hé)成(chéng)磷脂，高分子聚(jù)乙(yǐ)二醇(chún)衍(yǎn)生物，嵌段(duàn)共聚(jù)物(wù)，磁性納(nà)米(mǐ)顆粒(lì)，納米(mǐ)金及(jí)納米(mǐ)金(jīn)棒，近紅(hóng)外(wài)熒光染料，活(huó)性熒(yíng)光(guāng)染(rǎn)料(liào)，熒(yíng)光標(biāo)記物，蛋(dàn)白(bái)交聯劑，小(xiǎo)分子PEG衍(yǎn)生物，點擊化學(xué)產(chǎn)品，樹(shù)枝狀(zhuàng)聚(jù)合(hé)物，環糊(hū)精(jīng)衍生(shēng)物，大(dà)環配(pèi)體(tǐ)類(lèi)，熒光量子點，透明質酸(suān)衍(yǎn)生物(wù)，石(shí)墨烯(xī)或(huò)氧(yǎng)化(huà)石(shí)墨烯(xī)，碳納米(mǐ)管，富勒(lè)烯，二氧化矽及介(jiè)孔(kǒng)二(èr)氧化矽(guī)，聚合物微(wēi)球(qiú)，近(jìn)紅(hóng)外熒(yíng)光染料，聚苯乙烯微球(qiú)，上轉換納米發(fā)光(guāng)顆粒(lì)，MRI核磁造(zào)影(yǐng)產品，熒光(guāng)蛋白(bái)及(jí)熒光探(tàn)針(zhēn)等等。

溫馨提(tí)示：供應(yīng)產品(pǐn)僅用(yòng)於(yú)科研，不能用於(yú)人(rén)體(tǐ)！

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