HRP-MAL|馬來酰亞(yà)胺修(xiū)飾的(dí)辣根過氧化物(wù)酶的(dí)介(jiè)紹(shào)
2025-02-24
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馬來(lái)酰(xiān)亞(yà)胺修(xiū)飾的辣(là)根過氧化(huà)物酶(méi)(Maleimide-modified Horseradish Peroxidase,Maleimide-HRP)是一(yī)種(zhǒng)通(tōng)過(guò)馬來酰亞胺與辣根(gēn)過氧(yǎng)化(huà)物(wù)酶共價結合的(dí)生化(huà)試劑,以(yǐ)下是其詳(xiáng)細介紹(shào):
結構(gòu)特點(diǎn)
馬來酰(xiān)亞胺修(xiū)飾的辣根過氧化(huà)物酶(méi)是通(tōng)過馬來(lái)酰亞胺基(jī)團(tuán)與HRP中的半(bàn)胱(guāng)氨(ān)酸殘(cán)基反應(yīng),生成穩定的共價硫(liú)醚(mí)鍵而製得(dé)的。馬(mǎ)來酰(xiān)亞胺通常用於與含巰基(-SH)的分子反應,因此(cǐ)它可以與(yǔ)蛋(dàn)白質中的(dí)半胱(guāng)氨酸殘(cán)基發生特異性反應(yīng),實現(xiàn)HRP的(dí)修飾(shì)。
製備(bèi)過(guò)程(chéng)
反(fǎn)應(yīng)條(tiáo)件:馬(mǎ)來酰亞胺(àn)與HRP的反(fǎn)應通(tōng)常在中性(xìng)或略鹼性(xìng)的(dí)環境中(zhōng)進(jìn)行(háng),以(yǐ)優化馬(mǎ)來酰亞胺與巰基的反(fǎn)應。反應(yīng)溫(wēn)度通(tōng)常(cháng)在室溫(wēn)或(huò)低溫(wēn)下,以避(bì)免酶(méi)的(dí)降(jiàng)解或(huò)其他副(fù)反應。
混合反應:將(jiāng)馬來酰亞(yà)胺試劑(jì)溶解在(zài)適當的溶劑中,並與(yǔ)含有(yǒu)巰基的HRP溶(róng)液混合。在(zài)適當(dāng)的(dí)條件(jiàn)下(xià)進(jìn)行反(fǎn)應,確(què)保馬來酰亞胺(àn)充(chōng)分標(biāo)記(jì)HRP。
純(chún)化(huà):反(fǎn)應(yīng)完成(chéng)後,通過色譜(pǔ)法(fǎ),透析(xī)等方法去除未反應(yīng)的馬來(lái)酰亞(yà)胺分子和(hé)其(qí)他(tā)雜質(zhì),獲得(dé)純淨的(dí)馬(mǎ)來(lái)酰(xiān)亞胺修飾的HRP。
功能與(yǔ)應用
功(gōng)能:馬來(lái)酰亞胺(àn)修飾的辣根(gēn)過(guò)氧(yǎng)化物(wù)酶繼承(chéng)了HRP的(dí)催化(huà)功能,能(néng)夠催化(huà)*與(yǔ)各種(zhǒng)底物的反應,產生可(kě)檢測(cè)的(dí)顏色變化。
應(yīng)用:
抗(kàng)體標(biāo)記:馬(mǎ)來酰亞(yà)胺修(xiū)飾的HRP可以與抗(kàng)體(tǐ)等生(shēng)物分(fēn)子共價(jià)結合,用於製(zhì)備(bèi)抗(kàng)體(tǐ)標(biāo)記物。在免(miǎn)疫(yì)印(yìn)跡(Western blot),ELISA等實驗中(zhōng),這(zhè)些(xiē)標(biāo)記(jì)物能夠(gòu)產生可檢(jiǎn)測的(dí)信號,用於目(mù)標(biāo)分(fēn)子的檢測和定位。
生物(wù)傳感(gǎn)器(qì):修(xiū)飾(shì)後的HRP可用於構建(jiàn)生(shēng)物傳感器,用於檢(jiǎn)測*或其他底物(wù)的(dí)含量。
信號(hào)放大工具:馬來(lái)酰亞胺修飾的HRP能(néng)夠在多(duō)種檢測(cè)係(xì)統(tǒng)中(zhōng)作為(wéi)信號放(fàng)大(dà)工(gōng)具,廣泛應(yīng)用(yòng)於(yú)生物醫學研究(jiū),診斷以及各(gè)種(zhǒng)分析檢測中。
注(zhù)意(yì)事項
純(chún)度(dù)與(yǔ)驗證(zhèng):馬(mǎ)來(lái)酰亞胺(àn)修飾(shì)的(dí)HRP的(dí)純(chún)度對實(shí)驗結(jié)果至關(guān)重要。通(tōng)常需(xū)要(yào)通(tōng)過(guò)紫外(wài)-可見光吸收光譜(pǔ)或其他方法(fǎ)檢測(cè)修(xiū)飾(shì)是(shì)否成功,並(bìng)確保(bǎo)產(chǎn)品的(dí)純度滿(mǎn)足(zú)實驗要求(qiú)。
儲存條(tiáo)件(jiàn):馬來酰亞(yà)胺修(xiū)飾的(dí)HRP應(yīng)在冷藏條件(jiàn)下保存,避免(miǎn)長時(shí)間暴(bào)露於高溫(wēn)或光(guāng)照(zhào)條(tiáo)件(jiàn)下,以保持(chí)其活性(xìng)和(hé)穩定性。
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溫(wēn)馨(xīn)提示:供應(yīng)產(chǎn)品(pǐn)僅(jǐn)用於科研(yán),不能用於人(rén)體!
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