氨(ān)苄青黴(méi)素-雞卵(luǎn)清白(bái)蛋白(bái)偶聯(lián)物的合成(chéng)方法有哪些(xiē)?
2024-10-22
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氨(ān)苄青(qīng)黴素-雞卵(luǎn)清白蛋(dàn)白偶聯物|Ampicillin-OVA Conjugate(Amp-OVA)
氨(ān)苄青黴素 - 雞(jī)卵清白(bái)蛋(dàn)白(bái)偶(ǒu)聯物(wù)的合(hé)成(chéng)方(fāng)法(fǎ)主要有以(yǐ)下(xià)幾(jī)種:
1.碳(tàn)二(èr)亞(yà)胺法:
原理(lǐ):碳(tàn)二(èr)亞胺類化(huà)合(hé)物可(kě)以(yǐ)作(zuò)為(wéi)脫水劑(jì),促(cù)進羧基(jī)和氨(ān)基(jī)之間形成酰胺(àn)鍵。氨苄(biàn)青黴(méi)素(sù)分子中存在羧基等(děng)活(huó)性基團(tuán),雞(jī)卵(luǎn)清白蛋(dàn)白(bái)上有(yǒu)豐富的氨(ān)基,利用碳(tàn)二亞(yà)胺使兩(liǎng)者發(fā)生(shēng)縮合反(fǎn)應(yīng),從(cóng)而(ér)實現偶聯(lián)。
步驟:首先將氨苄青黴素(sù)和雞卵清(qīng)白蛋(dàn)白分別溶(róng)解在合(hé)適的緩(huǎn)衝(chōng)液(yè)中(zhōng),然後將(jiāng)碳二(èr)亞(yà)胺(àn)試劑(如 EDC,即(jí) 1 - 乙基 -(3 - 二甲基氨(ān)基丙(bǐng)基) 碳二(èr)亞胺鹽(yán)酸(suān)鹽)加(jiā)入到氨苄青(qīng)黴(méi)素(sù)溶液中(zhōng),活(huó)化(huà)一段(duàn)時(shí)間(jiān)後(hòu),將活化後(hòu)的(dí)氨苄青黴素(sù)溶(róng)液緩(huǎn)慢滴(dī)加到雞卵清(qīng)白蛋白溶(róng)液中,在一定(dìng)的溫度(dù)和 pH 條件下攪(jiǎo)拌反(fǎn)應數(shù)小時。反(fǎn)應(yīng)結束後,通過(guò)透(tòu)析(xī)或(huò)凝膠過(guò)濾等方(fāng)法去除未反應的物質和雜質(zhì),得(dé)到(dào)氨(ān)苄青黴(méi)素(sù) - 雞卵清白(bái)蛋(dàn)白偶聯物(wù)。
2.戊二醛法:
原理:戊(wù)二醛(quán)是一(yī)種雙功能(néng)交(jiāo)聯(lián)劑,能(néng)夠與(yǔ)蛋白(bái)質(zhì)分(fēn)子(zǐ)中的氨基發(fā)生反應,形(xíng)成席(xí)夫鹼(jiǎn)結(jié)構(gòu),從(cóng)而(ér)將(jiāng)兩個(gè)蛋白質分(fēn)子(zǐ)連(lián)接起來。
步(bù)驟(zhòu):把雞卵清(qīng)白蛋(dàn)白溶解在緩衝液中,加(jiā)入(rù)適(shì)量(liáng)的(dí)戊二醛(quán)溶(róng)液(yè),在(zài)一定(dìng)溫(wēn)度(dù)下(xià)攪拌(bàn)反應一(yī)段(duàn)時(shí)間(jiān),使雞(jī)卵清(qīng)白(bái)蛋白(bái)分(fēn)子(zǐ)之(zhī)間(jiān)發生(shēng)輕(qīng)度交聯(lián),這(zhè)樣可(kě)以(yǐ)增(zēng)加蛋白的反應活性位點。然(rán)後將氨苄(biàn)青(qīng)黴素加入(rù)到(dào)上(shàng)述(shù)反應(yīng)體(tǐ)係(xì)中(zhōng),繼(jì)續在適宜(yí)的條件(jiàn)下反(fǎn)應數(shù)小(xiǎo)時(shí)。反(fǎn)應(yīng)完成後(hòu),同(tóng)樣(yàng)需要(yào)進(jìn)行純(chún)化(huà)處(chǔ)理(lǐ),以(yǐ)獲得純(chún)淨的(dí)偶聯物。
3.活性酯法(fǎ):
原(yuán)理:先將氨苄(biàn)青(qīng)黴(méi)素轉(zhuǎn)化為(wéi)活性酯形(xíng)式,活性(xìng)酯能夠與(yǔ)雞卵清白蛋(dàn)白上(shàng)的(dí)氨基快速反應(yīng),形成(chéng)穩定的(dí)酰胺鍵,完成(chéng)偶聯。
步驟(zhòu):使用如 N - 羥基琥(hǔ)珀(pò)酰(xiān)亞胺(NHS)等(děng)試劑與(yǔ)氨(ān)苄(biàn)青黴(méi)素(sù)反(fǎn)應(yīng),生成氨(ān)苄(biàn)青(qīng)黴(méi)素的(dí)活(huó)性酯衍生物。將(jiāng)雞(jī)卵(luǎn)清白蛋白溶解在合(hé)適的緩(huǎn)衝(chōng)液(yè)中,再(zài)將(jiāng)製(zhì)備好(hǎo)的氨苄青黴素活(huó)性(xìng)酯(zhǐ)衍(yǎn)生(shēng)物緩慢加入(rù)到雞卵(luǎn)清(qīng)白蛋白溶(róng)液(yè)中,在一定(dìng)的溫度和 pH 條(tiáo)件(jiàn)下反(fǎn)應數(shù)小時(shí),使兩者(zhě)發生偶聯反(fǎn)應(yīng)。最(zuì)後通過(guò)純化步驟去除(chú)未(wèi)反應的物質(zhì),得(dé)到氨苄(biàn)青黴素 - 雞(jī)卵(luǎn)清白蛋白(bái)偶(ǒu)聯(lián)物(wù)。
關(guān)於(yú)我(wǒ)們:
陝西星貝(bèi)愛科(kē)生物科技(jì)經營的產品(pǐn)種類包(bāo)括有:合(hé)成(chéng)磷脂,高(gāo)分子聚乙(yǐ)二醇(chún)衍(yǎn)生物,嵌(qiàn)段(duàn)共(gòng)聚(jù)物,磁性(xìng)納米顆粒,納米金及納米金(jīn)棒,近(jìn)紅(hóng)外熒(yíng)光染料(liào),活(huó)性(xìng)熒光染料(liào),熒(yíng)光(guāng)標記(jì)物,蛋(dàn)白交(jiāo)聯劑(jì),小(xiǎo)分子(zǐ)PEG衍生物(wù),點擊化學產品(pǐn),樹枝狀(zhuàng)聚合物,環糊精衍生物,大環配(pèi)體類,熒光量(liáng)子點,透明質(zhì)酸衍生物,石(shí)墨(mò)烯(xī)或(huò)氧(yǎng)化(huà)石墨(mò)烯,碳(tàn)納(nà)米(mǐ)管,富勒(lè)烯(xī),二氧化(huà)矽及介(jiè)孔(kǒng)二氧化(huà)矽,聚(jù)合(hé)物微球,近紅外(wài)熒(yíng)光染料(liào),聚(jù)苯乙(yǐ)烯微球,上(shàng)轉(zhuǎn)換納(nà)米發(fā)光顆粒(lì),MRI核(hé)磁造(zào)影(yǐng)產品,熒光(guāng)蛋白及(jí)熒光(guāng)探(tàn)針等等。
溫馨提示(shì):供(gōng)應產(chǎn)品僅用於(yú)科研,不能用(yòng)於人(rén)體!
相(xiāng)關產(chǎn)品:
吲哚(duǒ)美辛-雞卵(luǎn)清白蛋(dàn)白(bái)偶(ǒu)聯物(wù),Indometacin-OVA Conjugate
吲哚美(měi)辛-牛血清(qīng)白蛋白偶(ǒu)聯(lián)物(wù),Indometacin-BSA Conjugate
FA-BSA-Cy7,葉(yè)酸(suān)-牛血清白蛋(dàn)白Cy7標記物,Folic Acid-BSA-Cy7 Conjugate
FA-HSA-Cy7,葉酸-人血(xiě)清(qīng)白(bái)蛋(dàn)白(bái)Cy7標記物(wù),Folic Acid-HSA-Cy7 Conjugate
FA-PLL-Cy7,葉酸聚賴(lài)氨酸(suān)Cy7標記物(wù),Folic Acid-PLL-Cy7 Conjugate
FA-PLL-Cy5.5,葉(yè)酸聚賴氨(ān)酸Cy5.5標(biāo)記(jì)物,Folic Acid-PLL-Cy5.5 Conjugate
FA-HSA-Cy5.5,葉酸(suān)-人血(xiě)清白蛋(dàn)白(bái)Cy5.5標(biāo)記物(wù),Folic Acid-HSA-Cy5.5 Conjugate
FA-BSA-Cy5.5,葉酸-牛(niú)血清(qīng)白(bái)蛋(dàn)白Cy5.5標記(jì)物,Folic Acid-BSA-Cy5.5 Conjugate
FA-Cy5.5,葉(yè)酸(suān)花(huā)青染(rǎn)料(liào)5.5標(biāo)記物(wù),Folic Acid-Cyanine 5.5 Conjugate
FA-Cy5,葉酸花(huā)青(qīng)染(rǎn)料5標記物,Folic Acid-Cyanine 5 Conjugate
半乳糖化人血清白(bái)蛋(dàn)白,Galactose-HSA Conjugate

